万 诚，李蕾嘉，熊 雪，罗文敏，王 莹

（贵州省生物研究所，贵州 贵阳 550009）

姬松茸（Agricus blazei Murrill）属于蘑菇亚纲（Agricomycetidae） 蘑菇目（Agaricales） 蘑菇科（A－garicaceae） 蘑菇属（Agaricus），又名巴西蘑菇、小松菇、太阳菇、巴西蘑菇、柏拉氏蘑菇[1]。原产于巴西，由于姬松茸具有浓郁的杏仁香味，菌盖嫩，菌柄脆，美味可口，含有丰富的蛋白质、维生素、糖类物质和多种氨基酸，在巴西圣保罗地区被称为“上帝的蘑菇”[1]。自1992年福建省农业科学院从日本成功引种以来，国内学者对姬松茸进行了大量研究，尤其是近几年，姬松茸的生物活性研究发展迅猛，并有一定成效[2]。尤其发现了其多糖具有抗疲劳、抗肿瘤、免疫调节、降血糖、抗炎、保肝等作用[3]。然而，姬松茸的育种工作仍存在杂交育种周期长、种质资源有限、缺乏定向育种关键技术等难题[4]，姬松茸DNA指纹图谱的研究也基本停留在2012年的研究水平[5-8]。因此，研究利用RAPD、ISSR、酯酶同工酶技术对11个不同来源的姬松茸菌株进行遗传多样性研究，分析比较其亲缘关系，为姬松茸的优良品种选育以及进一步研究提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试菌株

共收集姬松茸菌株11个，名称与来源见表1。

表1 供试菌株及来源情况Tab.1 Strains and sources

1.1.2 培养基

用于姬松茸菌丝培养的马铃薯葡萄糖琼脂（PDA） 综合培养基配方（1 L）：马铃薯200 g、蛋白胨 5 g、蔗糖 20 g、琼脂 20 g，水 1 000 mL，120℃灭菌 30 min。

1.1.3 主要试剂

用于酯酶同工酶试验的药品有：磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、过硫酸铵、四甲基乙二胺（TEMED）、三羟甲基氨基甲烷（Tris）、乙酸-1-萘酯、乙酸-2-萘酯、固蓝RR盐均购自上海生工生物工程股份有限公司。

用于RAPD与ISSR试验的药品有：琼脂糖、核酸染料、Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒、2×SanTaq PCR Mix、DNA分子量标准，均购自上海生工生物工程股份有限公司。……