李 越，董 炜，周晓艳，尹 阳，2，肖姗姗，3，何 谦

（1.西安交通大学第二附属医院检验科，陕西西安 710004；2.西电集团医院检验科，陕西西安710002；3.空军军医大学唐都医院儿科，陕西西安 710038）

乳腺癌是威胁全球女性健康和生存的常见疾病，发病率已占据女性恶性肿瘤的首位[1]。目前，对乳腺癌转移的治疗仍缺乏明显的突破，针对三阴性乳腺癌的治疗也缺乏有效的手段。近年研究发现，青蒿素及其衍生物可抑制肿瘤细胞增殖，诱导凋亡，诱导细胞周期停滞和抑制血管生成[2-5]，但其抑制肿瘤发展和转移的机制尚未完全阐明。本课题组之前的研究发现，双氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）可以抑制乳腺癌MCF-7细胞生长。生物信息学结果提示，TGF-β1与CIZ1之间 存 在 蛋白 质 相 互作 用 关 系[6]。因此，本研究将重点研究DHA对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系的抑制作用及其分子机制，为后续癌症机制的实验研究和三阴性乳腺癌治疗靶标的探索提供理论基础，并为研发青蒿素等天然产物抗肿瘤新药提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料高侵袭转移性的三阴性乳腺癌MDAMB-231细胞系由西安交通大学第一附属医院肿瘤科惠赠。DHA购自合肥巴斯夫生物有限公司（BOSF），重组TGF-β1因子(HEK293 derived)购自美国PeproTech公司，选择性TGF-β1/Smads通路抑制剂SD208购自上海碧云天生物公司（Beyotime），Trizol试 剂 购 自 美 国Thermal Fisher公 司，Prime⁃ScriptTMRT Reagent kit购自大连宝生物公司（TaKaRa），SYBR Green荧光定量super mix购自北京全式金生物有限公司(TransGen)，兔抗人CIZ1抗体购自武汉爱博泰克公司Abclonal，兔抗人TGF-β1及兔抗人snail购自 美国Abcam公司，兔抗 人p-smad2/3及兔抗人t-smad2/3购自Cell Signaling Technology，鼠抗人GAPDH购自美国Origene公司。引物（Primer）由北京鼎国昌盛生物技术有限公司设计并合成。……