张远科， 徐 鸿， 曹 治， 冉 松， 马 靓， 曾晓希

产纤维素酶细菌的筛选及其产酶优化

张远科， 徐 鸿， 曹 治， 冉 松， 马 靓， 曾晓希*

（湖南工业大学生命科学与化学学院，湖南 株洲 412007）

利用刚果红染色法筛选产纤维素酶菌株，采用分子生物学技术和形态学观察作为鉴定手段，通过滤纸条崩解实验测定实际降解能力。以葡聚糖内切酶活（CMCase）和滤纸酶活（FPase）为指标，进行单因素和响应面试验优化。结果表明，获得一株产纤维素酶细菌（Xh-12），鉴定为不动杆菌属，发酵培养7 d后对滤纸条的减重率可达54.4%。在接种量1.5%、温度39℃、pH＝6.7的最优培养条件下，CMCase活力为1.05 U/mL，FPase活力为0.76 U/mL，具有较高酶活力。

纤维素；纤维素酶；酶活力；不动杆菌；响应面

纤维素属于可再生资源，是自然界分布最广、含量最多的多糖之一[1-3]。据调查，全球每年纤维素产量可达1 100亿t[4]。纤维素作为一种自然资源其本身不具有污染性，但由于纤维素通常与半纤维素、木质素紧密结合使得其结构复杂多样，导致了纤维素在自然状态下降解非常困难[5-6]。秸秆等纤维素资源的不正当处理不仅对人体健康造成威胁，而且对生态环境具有严重破环性[7-9]。因此，寻找新型环保的纤维素处理手段，减轻环境压力，实现资源的高效利用是目前的研究热点。

纤维素酶是具有水解纤维素能力的一类酶的总称[10-13]。到目前为止纤维素酶约占据全球酶市场的20%，成为了一种极具工业生产价值的酶[14-15]。研究发现，由于真菌对底物具有较高的利用率和渗透能力，其纤维素酶分泌能力较强，因此目前国内外研究较多的是真菌纤维素酶[16-18]。……