门娟娟

（山东省高密市醴泉街道畜牧兽医站 261512）

猪流行性腹泻主要是猪流行性腹泻病毒导致的一种猪肠道传染病，此病可使猪出现呕吐、腹泻及脱水症状，近年来，随着我国猪养殖业的规模逐渐扩大，此传染病的发病率有所上升。其症状表现、流行病学、病毒形态学及病理变化等方面与猪传染性胃肠炎非常相像，所以对猪流行性腹泻的诊断存在一定难度，需要通过实验室检验的方式对病猪进行检查，从而科学的进行猪流行性腹泻诊断，为病猪有效治疗提供依据。

1 免疫荧光法概述

1.1 概念

免疫荧光法主要是将免疫学法同荧光标记技术相结合来对特异蛋白抗原在细胞内部中的分布进行研究的一种检测方法。因荧光素能发出荧光，并且在荧光显微镜下能被检出，所以可以对抗原实施细胞定位，通过免疫荧光技术对细胞或者说细胞组织内部的抗原及半抗原物质显示和检查，故称之为免疫荧光细胞化学技术。

1.2 应用方法

本次主要是观察免疫荧光法诊断猪流行性腹泻的效果，所以选取的检验对象应为病猪，需要对病猪实施解剖操作，并取部分小肠，将其作为冰冻切片，也可以选取小肠黏膜进行抹片，然后将获取的标本防治在自然环境之中自然风干，完成风干操作后需要通过丙酮对其实施固定，然后将荧光抗体加入完成染色操作，染色程序如下。

（1)标准养性抗原片以及阴性抗原片通过0.01MPBS（pH7.4)进行预湿。

（2)应将被检血清进行稀释，并向涂片地价，然后放置37℃的恒温盒之中感做30min。……