朱道仙 刘 莉 陆 江

江苏农牧科技职业学院，江苏泰州225300

动物肠道内存在着数量庞大、结构复杂的微生物群落，对宿主营养物质的消化吸收、疾病预防起着重要作用[1]。不同的饮食习惯和生活环境对犬的胃肠道菌群有重要影响，许多研究表明犬胃肠道菌群的改变与不同疾病有关，如炎症性肠病（IBD）、慢性肠病及急性腹泻等[2]。动物双歧杆菌可抑制肠道内致病菌生长繁殖，能够合成维生素B1、B2、B6和K等营养物质，并具有调理胃肠的功能[3]。但关于动物双歧杆菌在宠物犬上应用报道较少，本研究通过观察动物双歧杆菌CP-9 对犬肠道菌群及粪便化学性状的影响，为该益生菌在犬上的应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

动物双歧杆菌CP-9 由浙江民生生物科技有限公司提供。

1.2 试验动物与设计

8条1岁左右的Beagle 犬，体重（7±1）kg，购于江苏农牧科技职业学院实验犬房。试验期间所有犬环境条件、基础日粮、饲养管理相同，试验前饲喂基础日粮2 d，试验期间饲喂基础日粮+益生菌（0.5 g/kg），试验期7 d。

1.3 样品采集与指标测定

1）生产性能观察。每天记录采食量、精神状态、腹泻情况等生理活动变化。

2）菌群结构检测。分别在试验的1、3、5、7 d，经直肠采集无菌粪便，用天平称取每份100 mg，根据试验要求处理后，按细菌基因组DNA 提取试剂盒提供的说明提取各组的粪便细菌DNA。将待测粪便样品中提取的DNA 分别进行4 种细菌的实时荧光定量PCR 反应，根据溶解曲线分析PCR 产物的特异性，并由Light Cycler PCR 仪分析定量结果，应用SPSS 19.0软件进行数据分析。

3）粪便水分含量测定。分别在试验的1、3、5、7 d，收集新鲜粪便，用烘干法测定。

4）粪便氨含量测定。分别在试验的1、3、5、7 d，收集新鲜粪便，用测氨仪测定。

5）粪便吲哚含量测定。分别在试验的1、3、5、7 d，收集新鲜粪便，用气相色谱法测定。

1.4 数据处理

数据用“平均值±标准差”表示，采用SPSS 22.0统计软件进行方差分析，P<0.05 表示差异显著，P<0.01表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 生产性能观察

饲喂期间，各组犬只采食状态良好，排粪及粪便正常，体温、脉搏及呼吸等生理活动均正常。

2.2 粪中含水量的变化

由图1可知，随着饲喂时间推移，粪中含水量逐渐升高，第5天变化最为明显，之后趋于平缓。试验结束时比第1 天升高了13.11%，差异显著，但未超出正常参考范围。说明该益生菌可以适量提高健康犬粪便中的水分，软化粪便，减少便秘的发生。

图1 益生菌对粪便含水量的影响

2.3 粪中氨的变化

从图2可以看出，随着饲喂时间的推移，粪中氨含量逐渐降低，第3 天出现显著差异，第7 天比第1天降低了14.81%。说明益生菌可以促进肠道氮的吸收，减少氨的排泄。

图2 益生菌对粪中氨含量的影响

2.4 粪中吲哚含量变化

由图3可知，随着饲喂时间的推移，粪中吲哚逐渐降低，第5天出现显著差异，第7天比第1天降低了18.07%。说明益生菌可以减少粪便中吲哚的排泄。

图3 益生菌对粪中吲哚含量的影响

2.5 肠道菌群的变化

由图4可知，益生菌可以升高犬肠道中乳酸杆菌、双歧杆菌数量和B/E值，降低大肠杆菌数。从第5天开始，效果显著升高，说明该益生菌可以提高肠道有益菌数量，降低有害菌数量，对维持肠道健康有促进作用。

图4 益生菌对肠道菌群的影响

3 讨 论

研究表明，当肠道内有高浓度水平的动物双歧杆菌时，可抑制外侵的病原大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌或内源的腐生菌、条件致病菌的生长繁殖。本研究结果表明，服用动物双歧杆菌CP-9 后，犬肠道中乳酸杆菌及双歧杆菌等有益菌数量增多，而大肠杆菌数量降低。说明动物双歧杆菌CP-9 可以改善犬肠道菌群。

大部分有害菌能产生氨和吲哚等代谢产物[4]。氨随粪便排出后可对环境造成污染；吲哚等需要在肝脏中代谢解毒，随尿以葡萄醛酸盐和硫酸盐等形式排出[5]。如果不能及时解毒，将导致肝功能紊乱和肾损伤[5]。本研究发现，动物双歧杆菌CP-9 可以显著降低粪便中的氨和吲哚含量，这可能与其有调节肠道菌群的作用有关。此外，动物双歧杆菌CP-9可以提高粪中水分含量，促进排便。综上所述，动物双歧杆菌CP-9 可以改善犬肠道菌群，减少有害代谢物产生，促进犬的健康成长。