芜菁实时荧光定量PCR内参基因筛选
2021-09-15任延靖赵孟良
青海农林科技 2021年3期
任延靖,韩 睿,赵孟良*
(1.青海大学农林科学院,青海 西宁 810016;2.青海大学 三江源国家农牧业国家重点实验室,青海 西宁 810016)
芜菁(BrassicarapaL.ssp.rapa),又称元根、园根、盘菜[1]。起源于欧洲,即是传统的栽培植物,也是青海高原特色的药材、蔬菜及饲料兼用的块根类作物。在其药用价值方面,近代药理研究发现,其具有预防癌症、抗衰老等功效[2]。在《名医别录》中记载:味苦温,无毒。古代中医书籍上综述,助消化,祛风,镇咳,驱腹胸寒气,解热毒,消肿,强身[3];《维吾尔药志》记:性温,开胸顺气,健胃消食,解毒;用于胸闷腹胃胀痛,食欲不振,疮疖肿毒等疾[4]。现代医药研究表明:芜菁内含硫化葡萄糖苷物质,水解后可产生芥子油,具有增进食欲,促进肠胃蠕动,帮助消化等作用[5]。近几年来,人们已经逐渐把对芜菁的研究侧重点放在了作为药材的领域[6],更多的关注其植株体内在的化学成分,如挥发油、脂肪酸、硫苷等代谢机理及调控基因通路方面的研究。
基因表达分析作为揭示植物生命周期中基因功能和调控机制的重要手段之一。因此确保相关基因表达分析的准确性十分重要[7]。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术作为一种常用的检测基因表达量的方法,具有定量准确、可重复性、高灵敏度等优点[8],广泛应用于基因检测、科学研究、药物研发与疾病诊断等领域[9-10]。选用表达水平不随发育阶段、组织类型等而显著变化的内参基因进行qPCR可以确保结果分析的准确性[11]。因此,在使用qPCR技术对基因表达进行检测分析之前,应筛选合适的内参基因。……
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