杜全能 区毅恒 余杰豪 刘子恒 史宝军

摘要：为获取丁酸梭菌芽孢高密度发酵工艺，以丁酸梭菌DSY-1为试验材料，以芽孢数为指标，通过单因素试验，探究碳源、氮源、接种量、初始pH值、培养温度和正交试验，并通过5 L发酵罐进行中和剂选择。结果表明，菌株DSY-1以C6H12O6 30 g/L、酵母提取粉10 g/L、NaCl 5 g/L、乙酸钠 5 g/L、K2HPO4 3 g/L、MgSO4·7H2O 0.3 g/L、L-半胱氨酸酸盐 0.5 g/L为发酵培养基，初始pH值为6.5，培养温度为35 ℃，接种量为2.5%，5 L发酵灌发酵使用12.5%氨水作中和剂时，菌株 DSY-1 芽孢数最大，达9.3亿CFU/mL。

关键词：丁酸梭菌;正交试验;芽孢生物量;发酵工艺

中图分类号：S182 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2021）16-0148-05

随着我国养殖业的发展，养殖模式已经转向集约化、规模化发展。为了减少病害，人们在饲料中添加抗生素，虽起到了促进动物生长的作用，但也造成了抗生素的滥用。我国每年约8 000 t的抗生素被用于动物疾病预防和治疗[1]。在禁抗大背景下，禁抗替抗已成为养殖行业持续健康发展和食品安全的重点话题。近年来，益生菌作为替抗产品，乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌等已被广泛应用于养殖业中[2-3]。

丁酸梭菌（Clostridium butyricum）属于梭菌科梭菌属，为革兰氏阳性厌氧杆菌，具有耐胃酸、耐胆盐特性。自1933年，日本Miyairy博士首次从粪便中分离出丁酸梭菌便引起了科学家广泛关注。目前，丁酸梭菌被广泛应用于养殖行业中。研究发现，在基础日粮中添加丁酸梭菌能够增强机体的免疫力、提高抗氧化性能[3-4]、改善肉品质[5-6]和肠道组织形态[7-11]、抑制肠道中有害菌群、提高有益菌群丰度[11-12]。

目前，制约丁酸梭菌微生态制剂大规模生产的主要因素是制备过程中菌体量和芽孢量过低。……