许珂,郭佳,葛明月,殷姜文,殷洁婷,张晗,李燕*

(1 石河子大学医学院,新疆 石河子 832002;2 石河子大学医学院第一附属医院,新疆 石河子 832002)

围术期神经认知障碍(Perioperative neurocognitive disorders,PND)的发病机制是多种因素的协同作用,迄今为止,确切机制尚不明确[1]。有研究报道,α-synuclein(α-syn)、β-Amyloid1-42(Aβ1-42)的过度表达可抑制多巴胺能神经元神经递质释放,这可能是术后3个月内PND的预测因素[2],并且选择性使中脑腹侧被盖区(Ventral tegmental area,VTA)多巴胺神经元变性可导致海马多巴胺流出量降低[3-4]。而多巴胺(Dopamine,DA)的细胞外浓度主要依靠多巴胺转运蛋白(Dopamine transporter,DAT)进行调控[5],因此本研究旨在观察中脑腹侧被盖区(VTA)多巴胺转运蛋白(DAT)的变化对老年大鼠术后认知功能的影响,并初步探讨VTA区DAT变化对老年大鼠术后认知功能的影响是否与调控海马区α-syn、Aβ1-42蛋白聚集有关。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

雄性,清洁级SD(Sprague Dawley)大鼠50只,18～20月龄,体质量300～500 g(石河子大学医学院动物实验中心提供)。饲养环境:大鼠自由活动、摄食、饮水,室温21～23 ℃,相对湿度为45～55%。采用随机数字表法分为5组,每组10只:空白组(Normal,N)、假手术组(sham,S)、PND模型组(PND,P)、AAV·DAT·RNAi(AAV)、AAV·NC(NC)。

1.2 老年大鼠PND模型建立

各组大鼠术前禁食12 h,自由饮水至术前2 h。P组大鼠尾静脉注射丙泊酚20 mg·kg-1诱导待翻正反射消失后,调整为11 mg·kg-1·h-1持续输注。腹部备皮,仰卧位固定于大鼠恒温手术台,手术切口处使用碘伏消毒三次,铺无菌洞巾。定位左肋缘下,于上腹部行纵切口约2 cm,逐层进入腹腔游离脾脏,用丝线结扎脾动、静脉两次,完整摘除脾脏。检查无出血及渗血后切口用丝线按腹膜,肌肉,皮肤逐层缝合后停止丙泊酚输注,术毕给予5 mg·kg-1酮洛芬皮下注射。……