与瓜类褪绿黄化病毒P22蛋白互作的寄主因子的筛选
2021-09-02陈思宇杨灵玲燕照玲韩晓玉李庆伦李洪连陈琳琳孙炳剑
陈思宇,杨 雪,杨灵玲,燕照玲,韩晓玉,李庆伦,李洪连,陈琳琳,孙炳剑,施 艳
(1.河南农业大学 植物保护学院,河南 郑州 450002;2.河南省农业科学院 农业经济与信息研究所,河南 郑州 450002)
瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbitchloroticyellowsvirus,CCYV)主要通过烟粉虱(Bemisiatabaci)以半持久性方式进行传播,侵染黄瓜、甜瓜等瓜类作物引起叶片褪绿和黄化,但是叶脉仍然保持绿色,严重时整株植物叶片变黄,已经成为制约瓜类作物产量和品质的重要病原[1-2]。日本最先报道该病害的发生[2]。我国于2011年首次报道了该病害的发生[3]。近年来该病害在我国迅速蔓延,目前在江苏、浙江、上海、台湾、新疆、湖南、山东、北京、海南、广西、河南、河北等地区都有发生[4-8]。
CCYV属于长线形病毒科(Closteroviridae)毛形病毒属(Crinivirus)。基因组由2条正单链RNA组成,RNA1长度为8 607 nt,编码4个阅读框,分别为甲基转移酶(MTR)和RNA解旋酶(Hel)、RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)、P1-6和P22;RNA2长度为8 041 nt,编码8个阅读框,分别为P4.9、Hsp70、P2-6、P59、P9、CP、CPm和P26[2]。
CCYV P22蛋白位于CCYV RNA1 3′末端,分子质量为22 ku。Chen等[9]研究证明了P22作为CCYV编码的沉默抑制子发挥作用。已有研究表明,CCYV P22蛋白与黄瓜SKP1LB1蛋白互作,并且确定了F-box like基序(-LKLLI-)是P22发挥沉默抑制子活性和致病性所必需的区域[9]。甘薯褪绿矮缩病毒(Sweetpotatochloroticstuntvirus,SPCSV)RNA1 3′端编码的P22蛋白能够抑制由双链RNA(dsRNA)诱导的RNA沉默,同时P22也可以抑制沉默信号的传导以及系统性沉默[10-11]。番茄褪绿病毒(Tomatochlorosisvirus,ToCV)RNA1编码的P22可以抑制由正义RNA和dsRNA引起的基因沉默,但是不能抑制沉默信号在细胞间扩散或长距离移动[12],突变P22蛋白中的锌指结构域,发现P22的dsRNA结合能力和沉默抑制子活性不受影响[13],用缺失P22的ToCV RNA1突变体和完整RNA2侵染本氏烟,依然能够成功侵染,却发现缺失P22会增加RNA1的积累量,但RNA2的积累量显著降低,表明P22能够维持ToCV RNA1和RNA2的平衡[14]。……
