人参实时荧光定量PCR 快速鉴别方法
2021-08-31李忠华杨宝马宁岳静怡郝娟赵丽红
李忠华,杨宝,马宁,岳静怡,郝娟,赵丽红
(1. 太原市食品药品检验所,山西 太原 030031;2. 山西国新晋药集团有限公司,山西 太原 030006)
0 引言
人参为五加科植物人参(Panax ginseng)的干燥根和根茎。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津养血、安神益智等功效[1-3]。目前,人参产业发展势头迅猛,人参市场除正品外,尚有代用品、伪品、混淆品,以假乱真的现象屡屡发生,人参饮片市场情况尤其严重,给药用市场管理带来极为不利的影响[4]。因此,急需一种能够快速、准确地鉴别人参的方法,从而确保人参的临床疗效,这对于药品、食品、保健品的质量保障具有十分重要的意义。
DNA 分子鉴定技术因其准确性、客观性,在中药材鉴定中的应用越来越受到人们重视。Shaw 等采用RAPD 法明显地区分开人参属的3 种药材及4种伪品[5],AP-PCR、PCR-SSCP 法也被应用在人参属药材的鉴定中[6-7]。崔光红等利用多重等位基因特异PCR 鉴别人参、西洋参[8];王雪松等采用PCRRFLP 鉴定人参真伪[9];徐凤娇等设计3 条引物多重PCR 方法鉴定人参和西洋参[10],上述三种方法均需要扩增后电泳,所需检测设备多,检测时间长,电泳毒性大。侯双利等基于β-actin 基因实时荧光定量PCR 鉴别人参真伪。黄林杰等运用qPCR 技术对蕲蛇、浙贝母进行了鉴别研究,该方法采用SYBR Green I 染料,染料毒性大,该方法较Taqman 探针法特异性差,且人参鉴别还需经溶解曲线确定是否为目的产物,检验过程耗时长[11-12];黄永辉等建立了qPCR 技术鉴别西洋参的方法[13];吴迪等使用qPCR技术准确地鉴别了紫河车掺伪品中的猪、牛、羊物种[14]。……