夏佳慧，张 静，姚 红

（上海市虹口区疾病预防控制中心 上海 200082）

诺如病毒为脊椎动物病毒嵌环样病毒科的一个属——诺如病毒属。诺如病毒的基因组为单股正链RNA,致病力极强，感染剂量低，10～100个病毒颗粒即可导致发病[1]。诺如病毒属病毒引起急性胃肠道感染，具有发病急、传播速度快、涉及范围广的特点。人群普遍易感，学龄前儿童、中青年、老年人等各年龄组均可发病[2-3]。2020年12月虹口区某养老机构发生多名老年人员发生呕吐、腹泻等急性胃肠炎症状。疾控人员赶赴养老机构进行流行病学调查和处置工作，并采集人员肛拭样本及可疑环境污染样本送往疾控中心实验室进行实时荧光逆转录聚合酶链反应法检测病毒核酸。

1.资料与方法

1.1. 一般资料

选取2020年12月虹口区某养老机构人员肛拭样本92份；可疑环境污染样本14份。

1.2 方法

1.2.1试剂与仪器 试剂：诺如病毒Ⅰ型/Ⅱ型核酸检测试剂盒购自上海伯杰医疗科技有限公司；RNA核酸提取试剂盒为Roche MagNA Pure LC 2.0核酸提取仪配套商品化试剂盒；核酸提取仪器：Roche MagNA Pure LC 2.0；PCR扩展仪：宏石SLAN-96P。

1.2.2检测依据 诺如病毒《感染性腹泻诊断标准》WS271-2007。

1.2.3样本预处理 颠倒混匀并取500μL样本于1.5 mL离心管中，8 000 rpm/min 10 min离心，取上清液备用。

1.2.4样本总RNA提取 将准备好的上清液置于RNA抽提仪器中进行总RNA提取。

1.2.5 RT-PCR检测 取qRT—PCR反应液12μL、qRT—PCR酶混合液4μL、引物探针NVGI/NVGII 4μL,配制成20μL反应体系。加入已抽提的RNA 5μL，终体积为25μL。扩增程序为：逆转录50℃、10 min；预变性95℃ 5 min；95℃ 10 sec，55℃ 40 sec，循环末端采集荧光信号，40个循环。

1.3 评价指标

阴性Ct值＞38或未检出；阳性扩增曲线呈S型且Ct值≤35。

1.4 统计学方法

采用SPSS 25.0统计软件进行数据处理，计数资料用频数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。……