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等位基因特异PCR法鉴定花生FAD2B新突变

2021-08-30韩宏伟王传堂王志伟孙东伟杜祖波唐月异王菲菲焦

花生学报 2021年2期

韩宏伟 王传堂 王志伟 孙东伟 杜祖波 李 秋 唐月异王菲菲焦 坤

(1.沈阳农业大学农学院,辽宁 沈阳 110866;2.山东省花生研究所,山东 青岛 266100;3.山东鲁花集团有限公司,山东 莱阳 265200)

花生是我国重要的经济作物和油料作物,据统计,2019年全国播种面积463万hm2,总产量1752万t,单产3781 kg/hm2[1]。花生籽仁富含脂肪、蛋白质、糖类、矿物质及多种维生素等,对促进人体新陈代谢和改善记忆力等都有所裨益,是一种集益智、抗衰、延寿等功效于一体的农产品[2]。

油酸和亚油酸是花生两种主要脂肪酸,两者之和约占脂肪酸总量的80%,呈显著的负相关关系,两者含量和比例是衡量花生和花生油品质的重要指标[3-5]。普通花生油酸含量一般为40%~60%,而高油酸花生油酸含量高于70%[6]。国内外研究发现,FAD2A和FAD2B即ol1和ol2两对隐性基因是控制花生高油酸性状的主效基因[3,7-9]。

杂交育种是培育高油酸花生品种的有效途径,但高油酸供体严重匮乏且多为F435型FAD2突变,花生高油酸育种狭窄的遗传基础亟待拓宽。据2016年底统计,我国38个高油酸花生品种高油酸供体为F435、SPI098、0002-2、CTWE和P76等5份材料(全部为F435型FAD2突变),国外高油酸供体主要有F435、458、FR596、GA-T2636M、AT 225 High oleic等材料,国内外可追溯高油酸供体的花生品种78%以上具有F435型FAD2突变[10]。

CAPS法、PCR产物直接测序法、Taq Man探针法、AS-PCR 法、KASP法等各种分子标记技术应用于花生FAD2基因型分析已有报道[11-14]。其中AS-PCR 法因其操作相对简单、对仪器设备要求不高而应用较广。

本团队前期筛选获得了高油酸花生化学突变体15L46HO,FAD2A/FAD2B基 因PCR 产 物直接测序结果表明,其FAD2A突变为F435 型(FAD2AG448A),FAD2B突变为新突变。……

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