牛流行热病毒山东分离株α3基因序列分析及原核表达与纯化
2021-08-30朱鸿超何畅侯佩莉王洪梅李雪漫唐文娟何洪彬
朱鸿超,何畅,侯佩莉,王洪梅,李雪漫,唐文娟,何洪彬
(1.山东师范大学生命科学学院/反刍动物疾病研究中心,山东 济南 250014;2.山东师范大学附属中学国际部,山东 济南 250014)
牛流行热病(bovine ephemeral fever,BEF)是一种通过空气、同槽、节肢动物(主要是蚊子)引起动物牛(黄牛、水牛和乳牛)的急性热性传染病[1-3],其特征为突然高烧,呼吸道、消化道严重的卡他性炎症以及运动障碍。该病多发生在6—9月份,流行面广、传播速度快、病势猛,尤其是高温多雨时发病率极高,短期内可使任何品种、性别、年龄的大批牛只黏膜化脓、奶量降低、瘫痪以及死亡,具有发病率、死亡率高等特点,给养牛业造成巨大的经济损失。目前在亚洲(中国的28个省)、非洲和大洋洲的40多个国家发现有BEF的广泛流行传播,防控牛流行热病已成为中国畜牧业的重中之重[4]。
牛流行热病病原为牛流行热病毒(bovine ephemeral fever virus,BEFV)[5]。该病毒为弹状病毒科、牛流行热病毒属的单股负链RNA病毒,只有一个血清型,病毒粒子主要存在于病牛呼吸道分泌物、血液及粪便中。该病毒基因组大小约为14.9 Kb,编码5个典型的弹状病毒结构蛋白(N、P、M、G和L)和6个非结构蛋白(Gns、α1、α2、α3、β和γ)[6,7]。其中α3蛋白是牛流行热病毒基因组编码的一个非结构蛋白,其功能报道较少[8]。
目前尚未有牛流行热病商品化诊断试剂盒,已上市批准的牛流行热病毒疫苗种类较少且单一[9-13]。因此本研究旨在通过生物信息学分析α3蛋白相关特征,构建pGEX-4T-1-α3原核表达载体,表达并纯化此蛋白,为进一步制备α3多克隆抗体、建立相关的血清学检测方法、研制高效准确的诊断试剂和新型疫苗等提供理论基础。……
