蔡超操 陈世玖 王成 刘珑玲 曾御

(遵义医科大学第五附属(珠海) 医院烧伤整形手外科，广东 珠海 519000)

近年来，在外科手术中,使用血管移植材料移植重建血管变得越来越常见[1-3]。目前对精子、卵细胞、胚胎等组织细胞的冷冻保存技术研究较为成熟，但对血管组织的深低温保存多处于动物实验阶段，且实验对象主要为大动脉或静脉，比较不同冷冻保护剂深低温冷冻保存人小口径动脉的实验研究报道罕见。本研究以病人放弃的小口径动脉为研究对象，评估甘油，二甲基亚砜、丙二醇、乙二醇四种冷冻保护剂的冻存效果，为血管的深低温保存提供依据。报告如下。

1 材料与方法

1.1材料 (1)实验材料：本实验材料为2016年9月至2018年9月遵义医科大学附属第五(珠海)医院因外伤而行截肢术后遗弃的肢体，严格无菌操作，显微镜下剥离修剪小口径动脉，每一片段0.5cm，收集45个片段。(2)主要实验试剂：甘油:广东恒健；丙二醇:山东酷尔；乙二醇:山东酷尔；二甲基亚砜:Amresco；RPMI-1640培养液:HyClone；胎牛血清:浙江天杭；苏木素:博士德生物；HE染色试剂盒:博士德生物；即用型SABC-POD(小鼠/兔IgG)试剂盒:博士德生物；小鼠单克隆抗体[VG-1] to VEGFA (ab1316):Abcam。(3)主要仪器设备：液氮罐:河南天驰；高压蒸汽灭菌器:广州科鹏；生物组织包埋机:泰维科技；石蜡切片机(TB-718):湖北泰维；自动组织脱水机:leica biosystems；光学显微镜:重庆奥特。一般外科手术器械、显微外科器械、手外科手术显微镜：由遵义医科大学第五附属(珠海)医院手术室提供。

1.2实验方法

1.2.1取材来源及血管制备 血……