叶长文，李 璐，贺 琛，李 栋，陈连芳，范 黎，陈 宸，魏雪团*

1.中国烟草总公司郑州烟草研究院，郑州高新技术开发区枫杨街2号 450001

2.华中农业大学食品科学技术学院，武汉市洪山区狮子山街1号 430070

雪茄烟是一种传统的烟草制品，通常以晾晒烟叶为原料，经多次发酵达到雪茄烟特殊的吸食品质。在发酵过程中微生物起着至关重要的作用［1-2］。李宁等［3］、杜佳等［4］采用传统的分离培养鉴别法，分别对雪茄烟叶叶面和茄衣发酵过程中微生物区系的变化进行了研究，发现在发酵过程中细菌为主要微生物，真菌含量较少，其中芽胞杆菌属为优势菌群。由于传统分离培养技术本身的局限，即使选择多种培养基和分离条件，也仅能从样品中分离出少量优势菌群，不能全面反映其微生物群落的真实组成［5-8］。近年来，基于细菌16SrRNA基因及真菌rRNA基因间隔区（Internal transcribed spacer，ITS）区域的高通量测序技术已广泛用于微生物多样性分析。该方法不仅省去了传统分离培养法的繁琐过程，并且为大量未培养微生物的研究提供了有效手段，促使烟草微生物多样性和优势菌群研究取得了新进展［5-11］。张鸽等［8］采用高通量测序和传统分离2种方法对比分析雪茄烟茄衣原料表面细菌的多样性及不同发酵时期的演替，证实了高通量测序法可更全面揭示微生物的多样性和演替规律。

由于雪茄烟叶原料、发酵工艺和生产环境等因素不同，各地区生产的雪茄烟中微生物种类组成可能存在较大差异。微生物群落的差异可能影响雪茄烟的发酵过程，进而影响雪茄烟产品品质。……