李 静 李艳红 陆雪莹 张志强 吴思雅

（1.新疆轻工职业技术学院食品与生物技术分院 新疆乌鲁木齐 830021；2.新疆师范大学生命科学学院 新疆乌鲁木齐830054；3.中国科学院新疆理化技术研究所干旱区植物资源化学重点实验室 新疆乌鲁木齐 830011）

优良品种是现代农业生产的重要基础，小麦（Triticum aestivum L）作为世界上第一大粮食作物，是人类最主要的食物来源。转基因大穗小麦是本实验室采用花粉管通道法将大赖草总DNA导入受体春麦761后获得的转基因小麦新株系，其具有大穗、多粒、大粒、高蛋白、抗黄萎病等优良变异[1]。缪军、王子霞等对大赖草、转基因大穗小麦及春麦761进行了RFLP、RAPD及SSR等一系列分析工作，从分子的角度证实了转基因大穗小麦中确实引入了供体大赖草的基因[2-3]。由于转基因大穗小麦是通过导入大赖草总DNA获得的，其在获得优良变异性状的同时，也引入了生长期延长、冬性化、分蘖数增加、株型分散等不利变异。为了去除不利变异基因，进一步获取优良性状基因片段，本文对转基因大穗小麦中导入的外源性DNA片段进行化学发光生物素探针标记Southern杂交检测分析，以期为后续小麦的遗传育种提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验材料

转基因大穗小麦和春麦761幼苗叶片（将其同条件种植后幼苗长至5 cm～8 cm时，剪取幼嫩叶片作为实验材料）；大赖草基因组总DNA为本实验室保存。

1.2 实验方法

1.2.1 基因组DNA的提取纯化

（1）提取。将植物幼嫩叶片样品分别加液氮依次磨碎，分别用CTAB法[4]抽提，经两次离心后，使用无水乙醇洗涤，真空抽干，在得到的DNA中加入2 mLl0 mmol/L的Tris·HCl（pH=8.0）充分溶解，于4 ℃保存。……