HPLC法同时测定茶叶中咖啡因和儿茶素
2021-08-24胡旭倩唐销蓉姚菲菲
胡旭倩,唐销蓉,姚菲菲,骆 灿
(1.赞宇科技集团股份有限公司,浙江杭州 310009;2.浙江金正检测有限公司,浙江义乌 322000)
茶多酚具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌、调血脂和降血糖等药理作用,被广泛应用于食品、医药保健品、功能性饮料和化妆品中[1-3]。儿茶素是茶多酚的主成分,也是其主要的药理活性物质,占茶多酚含量的60%~80%[3-5]。
1 材料和方法
1.1 仪器与试剂
Agilent 1260超高效液相色谱仪(配紫外检测器)(美国Agilent公司);超声波振荡器(昆山禾创超声仪器有限公司);数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司);涡旋混合仪(上海精科实业有限公司);纯水净化仪(杭州永洁达净化科技有限公司);甲醇为色谱纯(美国大地公司);甲酸为分析纯(上海安谱实验科技股份有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 流动相的配制
①流动相A(0.1%甲酸水)。1 000 mL水中加入1 mL的甲酸,超声脱气备用。②流动相B(0.1%甲酸甲醇)。 1 000 mL甲醇中加入1 mL的甲酸,超声脱气备用。
1.2.2 标准溶液配制
(1)标准储备溶液的配制。准确称取儿茶素(C)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)和咖啡因(CAF)0.100 0 g(精确到0.000 1 g)于50 mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,配制成浓度约为2.0 mg/mL的标准储备液。
(2)标准混合工作溶液的配制。用甲醇溶液稀释儿茶素及咖啡因的混合标准储备溶液,得到适量质量浓度的混合标准工作溶液。
1.2.3 色谱条件
安捷伦C18(4.6 µm×250 mm)色谱柱;柱温30 ℃;流速 0.8 mL/min,进样量20 µL,紫外检测器检测,检测波长:280 nm,流动相条件如表1所示。

表1 流动相条件
1.2.4 提取方法
称取1.0 g均匀磨碎的试样于50 mL离心管中,加入在75 ℃中预热过的70%甲醇溶液30 mL,用玻璃棒充分搅拌均匀湿润,立即移入75 ℃水浴中,浸提30 min,期间不间断搅拌几次,取出,冷却至室温。……
