分光光度法测定发酵型枸杞酒中的枸杞多糖含量
2021-08-24韩秋珍罗珮妍凌育昕罗小宝周芳梅
韩秋珍,罗珮妍,凌育昕,罗小宝,周芳梅
(1.广东省食品工业研究所有限公司,广东广州 511442;2.广东省食品质量监督检验站,广东广州 511442; 3.广东省食品工业公共实验室,广东广州 511442)
枸杞多糖作为一种天然植物多糖,具有重要的生物活性,具有免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗炎镇痛、抗疲劳、神经保护及生殖功能保护等作用[1-3]。枸杞多糖作为发酵型枸杞酒中的重要功能成分,对其含量进行检测很有必要。目前测定多糖的标准主要采用葡萄糖作为标准物质,苯酚-硫酸法进行样品前处理,分光光度法进行测定,但这些标准方法不适用于测定发酵型枸杞酒中的枸杞多糖含量[4-6]。由于选择葡萄糖作为标准物质时,需进行系数换算,本方法直接选用葡聚糖作为标准物质。本方法主要从苯酚用量、硫酸用量、检测波长3个方面进行实验比较,得到最佳的检测方法,为优选发酵型枸杞酒提供依据。
1 材料和方法
1.1 仪器与试剂
1.1.1 试剂
浓硫酸(比重1.84);标准物质:葡聚糖(CAS号9004-54-0);苯酚溶液(50 g/L):称取精制苯酚5.0 g,加水溶解并稀释至100 mL,混匀;无水乙醇;80%(V/V)乙醇溶液:20 mL水中加入无水乙醇80 mL,混匀。
1.1.2 仪器与设备
分光光度计、离心机(3 000 r/min)、50 mL离心管等。
1.2 方法
1.2.1 标准曲线的绘制
(1)储备液的配制。准确称取相对分子质量5×105已干燥恒重的葡聚糖标准品0.104 6 g,加水溶解,并定容至100 mL, 混匀,置冰箱中保存。此溶液1 mL含有1.046 mg葡聚糖。
(2)标准曲线的绘制。吸取葡聚糖标准储备液10.00 mL, 置于100 mL容量瓶中,加水至刻度,混匀,置冰箱中保存。此溶液1 mL含有葡聚糖0.104 6 mg葡聚糖。……
