miR-877-3p对骨质疏松症小鼠骨髓间充质干细胞增殖能力的影响
2021-08-21舒林径
童 徐,舒林径
1.重庆医科大学附属口腔医院修复科,重庆 401147;2.口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室,重庆 401147;3.重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室,重庆 401147;4.重庆医科大学附属口腔医院种植科,重庆 401147
骨质疏松症是以骨质丧失及骨破坏为特点的一类全身性疾病,严重影响人们的生活质量。该疾病与雌激素缺乏相关,尤其以绝经后女性高发[1]。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是存在骨髓中的多潜能干细胞,其能够分化为成骨细胞、成软骨细胞、成脂细胞等[2-4]。因此,BMSCs在维持骨平衡稳态、维护骨健康中发挥重要作用[5]。BMSCs生物学特性的改变会打破骨平衡稳态,从而导致骨质疏松症的发生[6]。然而,其具体机制仍不明确。微小RNA(microRNA,miRNA)能够调控多种细胞的增殖、分化、凋亡,受到研究人员的关注[7-9]。细胞内miRNA表达的变化会导致细胞生物学特性的改变,从而导致疾病的发生。研究[10]发现,miR-877-3p能够促进细胞的分化;但尚无研究指出miR-877-3p能够调控BMSCs的增殖能力。本实验旨在研究绝经后骨质疏松症发生、发展过程中,雌激素的减少是否影响miR-877-3p的变化,并调控BMSCs的增殖能力。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 8周健康雌性WT C57BL/6J小鼠,购于重庆医科大学实验动物中心。动物生产许可证号为SCXK(渝)2018-0003,使用许可证号为SYXK(渝)2018-0003。将小鼠在SPF级动物房饲养,自由饮水及采食。所有动物实验经重庆医科大学附属口腔医院伦理委员会批准[2020年伦审(067)号]。
1.1.2 主要试剂及设备 胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)(天杭生物,中国);α-MEM培养基(Gibco,美国);实时荧光PCR(real-time PCR)试剂盒、RNA提取试剂盒(TaKaRa,日本);茜素红、胰蛋白酶(Sigma,美国);……