王昊，尹莲，刘洁霞，贾丽丽，丁旭，沈迪，冯凯，徐志胜，熊爱生

类胡萝卜素裂解双加氧酶基因调控芹菜不同组织的着色

王昊，尹莲，刘洁霞，贾丽丽，丁旭，沈迪，冯凯，徐志胜，熊爱生

南京农业大学园艺学院/作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，南京 210095

【】研究类胡萝卜素裂解双加氧酶基因在不同颜色芹菜中的基因型及相对表达量，结合类胡萝卜素含量测定，分析对芹菜组织中类胡萝卜素积累的影响，为进一步研究CCD亚家族基因在不同颜色芹菜组织着色中的作用奠定基础。采用同源比对法检索芹菜基因组中的CCD家族基因。从‘津南实芹’‘黄太极’‘紫杆一号’和‘赛雪’4种不同颜色芹菜中分别克隆获得芹菜类胡萝卜素裂解双加氧酶基因。对芹菜AgCCD4的蛋白氨基酸序列组成、蛋白质理化性质、亲缘关系、空间结构等进行分析，预测其保守结构域和二级结构以及建立三级结构模型。采用荧光定量PCR技术检测在不同颜色芹菜不同组织中的表达水平。采用超高效液相色谱（UPLC）对4种颜色芹菜的叶片、叶柄和根中叶黄素和-胡萝卜素的含量进行测定。采用农杆菌介导的瞬时表达转化法，研究AgCCD4蛋白在烟草表皮细胞中的亚细胞定位。序列分析结果表明包含1个长度为1 779 bp的开放阅读框（ORF），编码592个氨基酸。‘赛雪’中的核苷酸序列与其他品种相比存在18个碱基和9个氨基酸位点的差异，蛋白质相对分子质量分别为65.07 kD和65.12 kD，等电点分别为6.03和5.95。……