马铃薯内生真菌中丁烯内酯类化合物诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制
2021-08-13黄蓉伍兴张娴艾洪莲
黄蓉,伍兴,张娴,艾洪莲
(中南民族大学 药学院 & 民族药学国家级实验教学示范中心,武汉 430074)
肿瘤是目前严重威胁人类生命健康的疾病之一,抗肿瘤药物不计其数,其作用机制也各不相同,其中诱导肿瘤细胞凋亡被认为是癌症药物治疗的有效途径. 调控细胞凋亡的通路主要有3种:线粒体通路、内质网通路和激活死亡受体通路. 研究表明,3条凋亡通路相互联系,相互调控,最终都会通过激活caspase级联反应引起细胞凋亡[1-2].
植物内生真菌是与植物共生而不引起植物病变和排斥的真菌[3],在与植物共同进化的过程中能产生与宿主植物相同或相似的次生代谢产物. 这些次生代谢产物结构新颖多样,生物药理活性丰富, 是药物筛选的天然宝库[4-5].α-丁烯内酯是一类广泛存在于天然产物的活性单元,其衍生物具有抗氧化、抗菌、抗炎和抑制α-葡萄糖苷酶等多种生物活性[6-8]. 在前期研究中,从马铃薯内生真菌Aspergilluscarneus中分离得到一系列丁烯内酯类化合物[9],其抗肿瘤活性未见报道. 因此,本文以人乳腺癌细胞株MCF-7细胞为研究对象,用MTT法检测这一类化合物抗肿瘤活性,初筛后选取了活性较好的化合物Asperteretal D(图1),本文就其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制展开研究.

图1 化合物Asperteretal D结构Fig.1 Structure of compound Asperteretal D
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
人乳腺癌细胞株MCF-7(武汉大学典型培养物保藏中心CCTCC);胎牛血清(浙江天杭),DMEM、胰蛋白酶(美国Hyclone);MTT(美国Sigma); GAPDH兔多抗(武汉三鹰)、PARP兔多抗、Caspase-9兔多抗、Caspase-3兔多抗、Active Caspase-3兔单抗、P53兔多抗、蛋白质分子量标准(武汉爱博泰克);……