张荣宗，江丁文，陈锦香

（惠安县乡镇畜牧兽医站，福建 惠安 362100）

枯草芽孢杆菌是一种有益菌，广泛分布在土壤、空气、水和腐败的有机物中。它是一种革兰氏阳性杆菌，大小为1.5μm×3.0μm，菌落粗糙、褶皱，能够运动，具有可休眠的芽孢结构。其中芽孢由芽孢衣和皮层等组成，可以抵抗不良环境的影响[1-2]。枯草芽孢杆菌能够消毒抑菌防腐，可以分泌多种酶和抑菌物质，阻止病原菌生长，使植物在表皮层形成保护膜[3]。除此之外，它还能够促进动物肠道有益菌生长、水生态环境修复、粪污除臭、杀灭寄生虫和卵、减少蚊虫苍蝇等的滋扰[4-5]，对铀、锰、砷等重金属富集[6]，起到促进生殖生长激素分泌、修复创伤感染、保护神经元、抗肿瘤活性、促血管扩张、营养保健、减少蛋白过敏源和增强动物免疫力[7]等作用。枯草芽孢杆菌可应用在生态发酵、微生物医学、动植物生产和保护、消毒杀虫、基因宿主细胞表达、生物制剂和生物防治、粪污环境污染控制等方面[8]。

在生物核酸基因转录翻译中，氨基酸的密码子在选择上存在偏好性，通过密码子优化增加宿主细胞中的最优密码子及次优密码子，可以使表达量提高几倍甚至几十倍[9-10]。为获得特定基因的表达蛋白，可先扩增不含信号肽和前导肽的编码基因，扩增片段连接质粒载体构建质粒重组体，然后将连接产物CaCl2法转化原核菌株或者电转化真核菌株，表达成熟的蛋白，最后运用SDS-PAGE和免疫印迹法检测蛋白[11-13]。其中，核酸基因的表达系统有以己糖类等为底物的大肠杆菌，以甲醇为碳源的毕赤酵母，保留野生菌株活性的枯草芽孢杆菌蛋白酶，以及病毒感染的昆虫细胞和哺乳动物细胞等。……