武 浩，李 猛

（信阳农林学院，河南 信阳 464007）

作物遗传育种是农业科学的主要学科之一，在现代农业种植中，要求利用作物遗传育种的专业知识和技能，研究作物生长发育规律同外界环境的相互关系，通过改变农作物的生产环境、种植制度等，探寻让作物高产、优质、高效的理论和措施。通过近30年的探索，当前中国在作物遗传育种方面已取得了一定的成就。

1 基因差异表达分析方法

1.1 差减杂交分析方法

该方法也叫做扣除杂交或是减法杂交，主要是对2种遗传背景大致相同而性状有所差异的材料开展的基因差异表达分析方法。差减杂交分析方法通过将试验作物的基因组DNA或者是aRNA经特定的核酸限制性内切酶消化后，在一定的条件下实现作物分子杂交，将2种作物相同的基因去除，取得杂交后的复合物，由此构建起差减文库，得到更加满意的作物基因分子。差减杂交分析方法已经在藏红花苷合成特异性表达中得到了应用，其所具有的较高的灵敏度，可以确保有效监测到藏红花苷的转录丰度情况[1]。

1.2 mRNA差异显示逆转录PCR

该方法是根据成熟作物的mRNA具有的特性展开的基因差异表达分析，其主要是通过含oligo（dt）n的寡聚核苷酸作为锚定引物，通过逆转录酶的催化作用，滞后完成对2种成熟作物的差异表达基因的筛选。该方法成熟、效率高、灵敏度高，对不同品种作物的基因差异性表达筛选具有重要的应用意义。

1.3 cDNA代表性差异分析方法

该方法是基于DNA代表性差异分析方法基础提出的，能够对2种农作物的cDNA进行有效的试验分析，通过对比分析实验组和对照组的扩增子来完成杂交处理，最终得到差异性产物[1]。……