中药不同提取物的抑菌活性及最优组方研究
2021-08-12陈桂平付戴波钟志勇刘兰平涂群许翔杨珍
陈桂平,付戴波,钟志勇,刘兰平,涂群,许翔,杨珍
(1.江西省养蜂研究所,江西南昌 330200;2.九江市畜牧兽医局;3.江西省农业技术推广中心;4.南康区农业农村局)
黄芩、黄连、金银花、蒲公英都是清热解毒的常用中药,来源广泛,价格低廉,但目前它们用于蜜蜂疾病防治方面的研究未见报道。
在前期研究中发现黄芩、黄连、金银花、蒲公英4种单味药材对蜂房球菌表现出一定的抑菌作用,为增强它们的抑菌效果,需对4味药材进行组方研究,筛选出最优组方,为后续开发新药提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试药材。黄芩、黄连、金银花、蒲公英均由江西某生物工程公司提供,药材经检定,均符合生药质量标准。
1.1.2 培养基。液体培养基由蛋白胨1g、半胱氨酸0.02g、葡萄糖0.5g、果糖0.5g、可溶性淀粉1g组成,加纯化水至100mL(用1mol/L KH2PO4调pH至6.6);固体培养基由液体培养基加琼脂2g组成,制法一致。
1.1.3 菌株。蜜蜂蜂房球菌(编号:181006),购于中国兽药监察所。
1.2 方法
1.2.1 中药提取物的制备。水提取法[1]:分别称取黄芩、黄连、金银花、蒲公英各100g,加入蒸馏水至500 mL,浸泡30min,沸腾后用文火煎煮45min,用4层纱布过滤,药渣加500mL蒸馏水再煎煮30min。合并3次滤液,减压浓缩成膏状,低温干燥后,得提取物,计算得膏率,灭菌备用。临用前,准确称取提取物加无菌蒸馏水配成生药含量为2g/mL的药液。醇提法[2]:将黄芩、黄连、金银花、蒲公英粉碎成粗粉(过40目筛),各称取粉末100g,用70%的乙醇400 mL浸泡3次,第1次浸泡30h,第2、3次各浸泡15h,过滤,合并3次滤液,减压浓缩至膏状,低温干燥后,得提取物,计算得膏率,灭菌备用。临用前,准确称取提取物加无菌蒸馏水配成生药含量为2g/mL的药液。……
