牛奶淀粉样蛋白A的原核表达及单克隆抗体制备
2021-08-10张正荣郭晨瑶陈诗胜赵亚男任建鸾戴建君
张正荣,郭晨瑶,陈诗胜,赵亚男,任建鸾,汤 芳,薛 峰*,戴建君,2
(1.南京农业大学 动物健康与食品安全国际合作实验室,江苏 南京210095;2.中国药科大学 药学院,江苏 南京 211198)
奶牛乳腺炎(bovine mastitis)又称为奶牛乳房炎,是一种影响奶牛健康的主要疾病,乳腺炎导致牛奶产量减少、治疗开支负担加重,严重时会导致奶牛被淘汰,对养殖业、乳品业造成巨大的经济损失[1-3]。乳腺炎通常通过诸如加利福尼亚乳腺炎测试(CMT)、对体细胞计数(SCC)的实验室分析或乳汁病原微生物检测法来诊断[4-5]。乳汁病原微生物检测法是目前对于奶牛乳房炎检测的“金标准”,缺点在于该方法较为复杂繁琐、耗时较长、成本较高,急需研究和开发更加灵敏可靠的奶牛乳腺炎预测生物标志物。目前,乳汁急性期蛋白、乳酶、乳成分等指标,以及血常规指标已经成为这方面的研究热点[6]。
急性期反应期蛋白(acute phase protein,APP)是在压力、外伤、感染或炎症等刺激激发动物机体产生的早期蛋白[7-8]。血清淀粉样蛋白A(SAA)是一种具有多种蛋白质种类的APP,主要在肝脏遭受急性刺激时产生,它的主要同种型为SAA1、SAA2和SAA3,其中SAA1和SAA2主要在肝脏中产生,而SAA3在肝外部位产生,且主要在牛奶中发现,被称为乳腺相关淀粉样蛋白A(M-SAA3)[9]。SAA和M-SAA3一起被称为牛奶淀粉样蛋白A(MAA),可在牛奶样品中进行测量。目前研究发现,在奶牛发生隐性乳腺炎期间,奶牛乳中MAA含量显著升高,牛奶中这种蛋白质的水平可作为奶牛乳腺炎感染的敏感指标[10-13]。目前对于奶牛中MAA的相关研究与检测较少,现有的成熟的检测方法只有ELISA法[14-15]。……
