纪开燕，杨 玲，吴姣姣，蒋明星，韩秀林，鲁 涛

(云南大学 生命科学学院，云南省微生物研究所，云南 昆明 650091)

格尔德霉素（geldanamycin，GM）是由放线菌产生的苯醌安莎类抗生素，因其具有极强的抗肿瘤活性，自发现以来就引起了研究者广泛关注，是有很好开发应用前景的药物.GM 的作用靶点是Hsp90，其能够特异性地抑制Hsp90 氨基端ATP 酶活性[1-2]，多种肿瘤相关蛋白皆需依赖Hsp90 ATP 酶来行使其功能.Hsp90 ATP 酶活性受到抑制导致该类蛋白降解，最终引起肿瘤细胞死亡[3-5].但是，此类化合物有肝毒性较强、水溶性差等缺点，阻碍了临床的开发应用，因此有必要研究其生物合成途径，以期对其进行基因改造或寻找其类似物[6-7].对GM 及其类似物生物合成的深入研究有助于对此类化合物的进一步研发.

关于GM 的生物合成途径已经有了一些研究[8-12]，这些研究表明LuxR 家族调控子GdmRⅠ和GdmRⅡ及TetR 家族调控子GdmRⅢ在格尔德霉素的生物合成中都起到正调控作用.我们克隆并测序了自溶链霉菌（Streptomyces autolyticus）CGMCC 0516 中格尔德霉素生物合成基因簇[13-14]，并证明了其中GdmRⅠ、GdmRⅡ及GdmRⅢ同样在格尔德霉素的生物合成中都起到正调控作用[15].但是，此类化合物生物合成的一些调控细节尚未完全解析.

在自溶链霉菌GM 生物合成基因簇中存在一个功能未知的基因orf17.该基因编码的蛋白属于MarR（multiple antibiotic resistance regulator）多重耐药调控蛋白.MarR 蛋白家族是原核生物的一个多效性转录调控子，通过与靶标DNA 结合从而阻遏转录[16]，参与细菌多种生命进程的调控，如抗药性和毒力因子相关基因的表达调控等，在致病菌适应外界压力的过程中也起到关键作用[17-19].在本工作中，我们对自溶链霉菌中Orf17 的功能进行了研究，成功构建了orf17突变株，并对突变株不同阶段的发酵产物进行了HPLC 分析；……