周 婷, 刘荣华. 袁 明

华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科，武汉 430030

卵巢癌是女性生殖系统三大肿瘤之一，其病死率在其中位居榜首。因早期发现困难，预后差，卵巢癌被称为“沉默的杀手”。临床上化疗耐药时常发生，因此，深入探讨卵巢癌铂类化疗耐药机制，有利于了解疾病的发生发展，进而采取针对性的治疗措施来逆转化疗耐药，提高卵巢癌患者的预后及生存质量。

我们在前期通过二维电泳及蛋白质谱分析等实验表明：作为重要的内质网蛋白之一的ERp29在卵巢癌顺铂耐药细胞株中的表达水平明显低于顺铂敏感株，在人卵巢癌组织标本中亦可见ERp29表达与正常组织比较差异具有统计学意义，夏庆安等[1]的研究也有相似结论。目前文献对ERp29报道较少，主要集中在胃肠道及乳腺肿瘤等方面，其与上皮性卵巢癌化疗耐药的关系尚未见报道。本研究拟通过分子生物学技术手段探讨ERp29对人上皮性卵巢癌细胞顺铂化疗敏感性的影响，希望能够进一步阐明其内在的机制，为实现卵巢癌精准化疗提供新的思路，进而改善卵巢癌患者预后。

1 材料和方法

1.1 材料

菌株采用华中科技大学同济医学院附属同济医院妇科肿瘤实验室保存的大肠埃希菌DH5α；限制性内切酶购自Takara公司；抗人ERp29鼠单克隆抗体购自Abcam公司；抗人β-actin鼠单克隆抗体及辣根过氧化物酶标记的二抗购自Santa Cruz公司；顺铂购自美国Sigma公司；G418、脂质体购自Gibco公司；沉默ERp29的siRNA通过Invitrogen网站设计，并由该公司合成，ERp29的有效沉默片段为(5′-3′)CCCTGGATACGGTCACTTT。……