膜联蛋白A7过表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响
2021-08-05王小杰柏友兰刘明伟王新杰李宏伟
王小杰,柏友兰,刘明伟,王新杰,李宏伟,李 欣*
(1.承德医学院基础医学院,河北承德 067000;2.承德市中心医院肿瘤科;3.承德市围场满族蒙古族自治县医院消毒供应中心)
胃癌是全球最为常见的恶性肿瘤之一,在我国的发病率及死亡率较高[1],由于其早期症状不明显,加之当前缺乏简易灵敏的筛查标志物,多数患者发现时便已经是晚期,给人们的健康和生活带来严重威胁,因此,寻找早期诊疗标志物已经非常必要。膜联蛋白A7(annexin A7,ANXA7)是第一个被分离出来的Ca2+依赖的磷脂结合蛋白超家族的一员[2],在细胞水平上发挥着胞外分泌、膜运输以及钙离子动态平衡等多种功能[3]。除此之外,大量研究表明,ANXA7在多种恶性肿瘤组织中都有异常的表达。在胃癌组织中,ANXA7表达异常增高[4],这提示,ANXA7与胃癌的发生发展存在某种关联,本研究通过在胃癌MGC-803细胞过表达ANXA7,观察MGC-803细胞增殖和凋亡的改变,从而为胃癌诊疗标志物的寻找提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
人胃癌MGC-803细胞(赛百慷上海生物公司);细胞培养基1640及胎牛血清(Gibco公司,美国);CO2培养箱(贺利公司,德国);pcDNA3.1-ANXA7重组质粒及空质粒购自Sino Biological公司,转染试剂lipofectamine2000(lipo2000)(Invitroden公司产品,美国);ANXA7、PCNA、CyclinD1、Casepase-3、Cleaved casepase-3及β-actin鼠源单克隆抗体均(Epitomics公司,美国),羊抗鼠二抗(KPL公司,美国),CCK-8(APExBIO公司,美国),细胞凋亡试剂盒(BD公司,美国)。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养及转染 人胃癌MGC-803细胞于含10%胎牛血清的1640培养基中,置于5%二氧化碳的37℃细胞培养箱中培养。将细胞分为ANXA7过表达组(pcDNA3.1-ANXA7)、阴性对照组(pcDNA3.1-NC)。其中ANXA7过表达组转染pcDNA3.1-ANXA7重组质粒,阴性对照组转染空质粒。……
