植石全，张恒通，韦武奇，李晓阳

（广东绿杨农业股份有限公司，广东 茂名525243）

蛋鸡出栏后，鸡舍会留存大量的病原微生物，通过清洗可以减少一部分，但仍会有残留，残留的病原微生物对下一批雏鸡生长具有很大的健康隐患，进而对产蛋期的生产性能造成影响[1]。因此，为了控制雏鸡的早期感染风险，必须建立完整的生物安全体系。其中，鸡舍的空舍消毒是生物体系建立的重要部分。由于鸡舍消毒的不彻底，导致鸡舍残留大量微生物，使得刚入舍不久的蛋雏鸡感染，无法建立完整的免疫系统，蛋鸡育雏的死淘率会明显增加[2]。因此，如何正确选择和使用消毒剂显得格外重要。盲目和不规范地使用消毒剂，不仅不能有效杀灭鸡舍内的微生物，且会造成消毒剂的残留和浪费，而选择合适的消毒剂能够有效控制蛋鸡舍传染病的发生[3]。市场上有种类繁多的消毒剂，其效果也各有不同，选择一种适合空舍消毒的消毒剂是规模化养殖场亟待解决的问题。因此，本研究选择三种养殖场常用的消毒剂，分别为卫可、安灭杀和消特灵，在广东绿杨农业股份有限公司进行消毒效果试验，通过检测消毒前后鸡舍内空气和设备表面的微生物情况，了解不同消毒剂对鸡舍的消毒效果，以期为规模化商品蛋鸡场育雏空舍消毒提供参考。

1 材 料

1.1 鸡场情况

试验于2020年冬季在广东绿杨农业股份有限公司进行。每栋鸡舍的长为100 m、宽15 m、高4.1 m（顶棚为6 m），雏鸡饲养期为1~91日龄，舍内设备配套齐全，每栋育雏舍的养殖规模达到10万羽左右，采用十列五层六走道层叠式的笼养模式，选择3栋作为试验用鸡舍。

1.2 主要试剂与仪器

卫可，主要成分为过硫酸氢钾复合物及氯化钠，有效氯含量不少于10%，购自英国安德国际有限公司；安灭杀，主要成分为戊二醛及苯扎氯铵，购自英国考文垂化学药品有限公司；消特灵，主要成分为二氯异氰尿酸钠，有效氯含量为20%，购自广州益牲宝动物药业有限公司；LB琼脂培养基，购自广东环凯微生物科技有限公司；菌落计数器（型号为XK-97A），购自上海力辰邦西仪器科技有限公司；生化培养箱（型号为LRH-150），购自上海一恒科学仪器有限公司。

1.3 采样时间

育雏舍的上一批蛋雏鸡转入蛋鸡舍后，对整个鸡舍进行人工冲洗。人工冲洗育雏舍后，对鸡舍进行采样，所采的样品（空气、料槽壁、鸡笼底、刮粪刀）为消毒前样品数据；然后用不同消毒剂进行消毒，育雏舍消毒48 h后对鸡舍所采的样品为消毒后样品数据。

2 方 法

2.1 消毒模式

共选3栋育雏舍，1号育雏舍采用卫可消毒，2号育雏舍采用安灭杀消毒，3号育雏舍采用消特灵消毒。各育雏舍的消毒模式见表1。

表1 各鸡舍消毒剂用法及用量

2.2 空气中微生物的检测

采用自然沉降法，根据五点梅花式在每栋鸡舍4个角落和中央各选1个点均匀分布，每个点3个平行样，采样高度为0.8 m，采样点需避开风口，四个角落的采样点离墙壁大约0.8 m，在各个采样点放置LB琼脂培养基，开盖，盖口置于平皿边缘，暴露10 min，盖上平皿并标记包好，放置37℃培养箱中培养24 h。在培养基暴露期间注意减少人员走动，关闭门窗，避免污染培养基。使用菌落计数器对培养皿上的细菌进行计数，计算各个采样点的平均菌落数，以每个培养皿上菌落数进行结果报告。

根据奥氏公式计算菌落总数：C=50 000×N/（A×T）

式中：C为每立方米菌落总数（cfu·m-3），N为培养皿菌落数（cfu），A为培养皿面积（cm2），T为采样时间（min）[4]。

杀菌率（%）=（消毒前菌落数-消毒后菌落数）/消毒前菌落数×100%

2.3 物体表面微生物的检测

采用3.5 cm×5 cm灭菌规板，放置在被检的物体表面上（料槽壁、鸡笼底、刮粪刀），用蘸有生理盐水的灭菌棉拭子在被检位置来回摩擦，采样时间为15 s，折断棉拭子，将其头部放进含有5 mL生理盐水的离心管中，带回实验室进行检测。在鸡舍前中后的料槽壁及鸡笼底各采1个样，在鸡舍后端的刮粪刀位置采1个样。

将离心管的待测样品充分摇匀，在无菌超净工作台内用生理盐水进行10-1~10-3倍稀释，每个稀释梯度用移液枪吸取1 mL置于培养皿中，每个梯度3个平行样，再倒入40~50℃的LB琼脂培养基中，摇匀冷却后将其放置在37℃培养箱培养36 h。每个样品的每个梯度都要在培养皿上做好相应的标记。使用菌落计数器对培养皿上的细菌进行计数，计算各个采样点的平均菌落数。

物体表面菌落总数（cfu·cm-2）=培养皿菌落数×5×稀释倍数/采样面积（cm2）

杀菌率（%）=（消毒前菌落数-消毒后菌落数）/消毒前菌落数×100%

3 结果与分析

3.1 不同消毒剂对育雏舍空气中微生物的消杀效果

采用五点梅花式对每栋鸡舍四个角落和中央进行微生物检测，计算杀菌率，结果见表2。

表2 不同消毒剂对育雏舍空气中微生物的消杀效果

由表2可知，卫可对1号育雏舍空气的最高杀菌率为46.77%，最低杀菌率为37.54%，平均杀菌率为41.82%；安灭杀对2号育雏舍空气的最高杀菌率为96.46%，最低杀菌率为88.22%，平均杀菌率为92.24%；消特灵对3号育雏舍空气的最高杀菌率为100.00%，最低杀菌率为86.12%，平均杀菌率为93.68%。卫可、安灭杀、消特灵消毒对1、2、3号育雏舍空气平均杀菌率结果分别为41.82%、92.24%和93.68%，卫可对安灭杀、消特灵消毒效果的t检验差异都显著（P<0.05)，安灭杀和消特灵消毒效果的t检验差异不显著（P>0.05)。从空气杀菌率总体来看，卫可消毒效果是最差的，安灭杀和消特灵的消毒效果较好，两者差异不明显。

3.2 不同消毒剂对育雏舍设备上微生物的消杀效果

对每栋鸡舍设备上微生物进行检测，计算杀菌率，结果见表3。

由表3可知，卫可对1号育雏舍设备的最高杀菌率为22.41%，最低杀菌率为11.32%；安灭杀对2号育雏舍设备的最高杀菌率为100.00%，最低杀菌率为99.78%；消特灵对3号育雏舍设备的最高杀菌率为99.99%，最低杀菌率为99.70%。用卫可、安灭杀、消特灵消毒后，1、2、3号育雏舍设备上平均总菌结果分别为5 382、2、2 cfu·cm-2。消毒后，1号育雏舍所有监测位置仍有大量的微生物，2号育雏舍所有监测位置的微生物量在4 cfu·cm-2以下，3号育雏舍所有监测位置的微生物量在3 cfu·cm-2以下。卫可、安灭杀、消特灵对1、2、3号育雏舍设备平均杀菌率结果分别为16.27%、99.97%和99.98%，卫可对安灭杀、消特灵消毒效果的t检验差异都显著（P<0.05），安灭杀和消特灵消毒效果的t检验差异不显著（P>0.05）。从设备消毒效果总体来看，卫可是消毒效果最差的，安灭杀和消特灵消毒效果较好，且两者差异不明显。

表3 不同消毒剂对育雏舍设备上微生物的消毒效果

4 讨论

养殖场舍内微生物的数量是评价养殖环境质量的重要指标，直接关系到入舍雏鸡的健康及后期蛋鸡生产性能的充分发挥[4]。韩文格[5]也有相应的报道，入舍雏鸡所处的环境质量决定了后期鸡群的健康状态，空舍消毒有利于切断上下批次鸡群疫病的传播。李玉清等[6]研究表明，消毒剂对鸡舍空气杀菌率达到了90%以上，说明了这种消毒剂对鸡舍空舍消毒是有效的。本试验结果表明，安灭杀及消特灵都可以明显降低规模化育雏空舍空气中的微生物数量，平均灭菌率分别达到了92.24%和93.68%，而卫可消毒的平均杀菌率只有41.82%，由此来看，安灭杀及消特灵消毒均能够对规模化养殖场蛋鸡舍空气中的微生物进行有效的消毒。

从三种消毒剂对设备的消毒效果来看，卫可对料槽壁、笼底、刮粪刀等表面微生物的杀菌率效果较差，杀菌率最高的位置只有22.41%，消毒后残留着大量的微生物，平均残留的总细菌为5 382 cfu·cm-2；而安灭杀及消特灵对料槽壁、笼底、刮粪刀等表面微生物有很强的杀菌率，所有位置杀菌率均达到了99%以上，两种消毒剂消毒后，舍内的微生物数量都大幅度地下降了，平均残留的总细菌数均为2 cfu·cm-2。说明不同消毒剂对于鸡舍设备表面的消毒效果是有很大的差异，安灭杀及消特灵消毒均能够对规模化养殖场鸡舍设备有理想的杀菌效果，而卫可消毒则不太理想。陈绍叔[7]用四种消毒剂带鸡消毒的效果表明，安灭杀具有最强的杀菌效果，而卫可的杀菌效果是最差的。甘永新等[8]的研究表明，二氯异氰尿酸钠具有很强的杀菌性能，可以大幅度地杀死各种微生物，在生产实践中具有较强的应用性。梁娜等[9]对二氯异氰尿酸钠也有类似的研究结果。卫可杀菌效果较弱的原因可能是：卫可的主要活性物质是过硫酸氢钾复合物，而过硫酸氢根具有很强的氧化能力，可以在水溶液中不断产生羟基自由基等，进而改变细胞膜的通透性达到杀菌的效果[10]，而喷洒鸡舍不利于过硫酸氢钾复合物释放羟基自由基等，反而它可能适用于水线消毒。畜禽空舍消毒是建立防疫的第一道防线，是畜禽建立完整的免疫系统的重要措施，有效的消毒能够杀灭病原微生物，为刚入舍的畜禽提供一个良好的生活环境[4]。为了避免细菌出现耐药性问题，空舍消毒的消毒剂最好交替使用。

5 结 论

安灭杀及消特灵的消毒效果优于卫可，而安灭杀和消特灵消毒效果无明显性差异，在实际生产中，安灭杀及消特灵可以在蛋鸡空舍消毒中交替使用，避免产生耐药性的病菌。试验结果表明安灭杀消毒和消特灵消毒都适用于规模化养殖场商品蛋鸡育雏空舍的消毒。