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润燥活血汤对干燥综合征模型小鼠血清及颌下腺M3R 表达的影响

2021-07-21张丹娜叶丽红刘喜德

浙江中西医结合杂志 2021年7期
关键词:小鼠血清模型

张丹娜 叶丽红 刘喜德

干燥综合征(sjogren's syndrome,SS)是一种以外分泌腺受损为主的慢性炎症性自身免疫病,以口干、眼干、关节疼痛为主要临床表现,亦可造成血液、肾、肺等全身各系统受损,甚至危及生命[1]。毒蕈碱样乙酰胆碱3 型受体(muscarinic acethyleholine receptor 3,M3R)主要分布于外分泌腺及平滑肌,阻断乙酰胆碱能神经信号的有效传递,损伤颌下腺和减少唾液输出量,造成涎腺分泌减少,从而引起口干眼干等SS症状。国内外多项研究证实,M3R 参与SS 的发病[2]。笔者临床观察发现,应用中医润燥活血汤治疗SS,可明显缓解患者口干、眼干等临床表现。本研究探讨润燥活血汤对SS 模型小鼠血清及颌下腺M3R 表达的影响及作用机制。

1 实验材料

1.1 动 物 8 周龄SPF 级健康BALB/c 雄性小鼠47 只,体质量(25.0±2.0)g,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供[SCXK(沪)2017-0005]。温度(20±2)℃,相对湿度50%~60%,光照12h 明暗交替,饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心清洁级小鼠实验室[动物实验条件合格证号:SYXK(浙)2013-0184;动物实验设施使用许可证编号:2015071]。

1.2 药 物(1)润燥活血汤(麦冬15g,生地10g,赤芍、丹参各9g,桃仁6g,玄参、白芍各9g,紫苑6g,生甘草3g)中药饮片与水以1∶7 的比例混合,浸泡2h,煮沸30min,过滤,药渣与水以1∶5 的比例混合,继续煎煮20min,过滤,合并2 次滤液,于水浴锅上浓缩成每毫升含生药1g 的药液,由浙江省中西医结合医院制剂室提供煎药制剂。(2)羟氯喹(HCQ)混悬液:将硫酸羟氯喹片(Sanofi-Synthelabo Ltd,批号H20090258,规格:200mg/片,碾磨成粉剂,与生理盐水按1.5mg/mL 的药物浓度配制成混悬液[3-4]。

1.3 试剂与仪器 弗氏不完全佐剂(Sigma,IFA)(Chondrex 公司提供,批号232-455-8);小鼠血清M3R 试剂盒(Mouse M3R ELISA Kit)(厦门慧嘉生物科技有限公司,产品编号MG3782);……

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