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白藜芦醇调控Treg/Th17 抑制溃疡性结肠炎肠道黏膜炎症的实验研究

2021-07-19顾秋平朱方擎刘金金谢俊锋汤建华

药品评价 2021年10期
关键词:小鼠模型

顾秋平,朱方擎,刘金金,谢俊锋,汤建华

赣州市人民医院,江西 赣州 341000

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是炎症性肠病的一种类型[1],发病人数逐年增多,其发病表现为炎症反应持续时间长,病情反复,不易医治。截至目前,UC 的成因以及发病机制还在研究当中,有研究显示,它的发生可能和遗传以及肠道黏膜免疫反应有一定的关联[2]。白藜芦醇存在于自然界很多植物中,属于酚类化合物,具有抑制炎症、抗肿瘤等功效,与此同时,还能保护机体的重要脏器[3-4]。本研究通过建立UC 模型小鼠,研究调节性T 细胞(Treg)/辅助性T 细胞17(Th17)在白藜芦醇治疗UC 中的机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康SPF 级C57BL/6 小鼠50 只,8 周龄,雌雄各半,体质量20~25 g,购于广东省医学动物实验中心,饲养于赣州市人民医院屏障级动物房,12 h 光照和黑暗循环,室内温度22±2℃,湿度45%~55%。

1.2 主要试剂与仪器

白藜芦醇(含量≥98%,上海源叶公司);PBS 缓冲液(上海索莱宝公司);莫能霉素(武汉欣欣佳丽公司);白细胞介素17(IL-17)ELISA试剂盒(北京中检公司);白细胞介素23(IL-23)ELISA 试剂盒(北京中检公司);FBS(上海慧颖公司);流式细胞仪(型号:Callibur Ⅱ,美国Becton Dickinson 公司);台式高速冷冻离心机(型号:TGL-16,湖南湘仪离心机仪器有限公司)。

1.3 实验方法

将小鼠随机分为5 组,每组10 只。阴性对照组饮用纯化水,模型对照组、阳性对照组与白藜芦醇(Res)组饮用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)7 d建立UC 模型。造模完成后,阴性对照组与模型对照组每日灌胃0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)0.2 mL;Res 低剂量组每日灌胃0.5%CMC-Na 溶解的8 mg/mL 的Res 0.2 mL;Res 高剂量组每日灌胃0.5%CMC-Na 溶解的16 mg/mL 的Res 0.2 mL;阳性对照组每日灌胃0.5%CMC-Na 溶解的16 mg/mL 的柳氮磺吡啶栓(SASP)0.2 mL,5 组均连续给药14 d。……

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