鸡滑液囊支原体的分离及生物学特性鉴定
2021-07-16郑朝朝邹立宏刘思桐郁宏伟赵玉龙张新新瑞普保定生物药业有限公司河北保定071000
郑朝朝 邹立宏 刘思桐 郁宏伟 赵玉龙 张新新/瑞普(保定)生物药业有限公司 河北保定071000
鸡滑液囊支原体(Mycoplasma Synoviae,MS)主要侵害商品肉鸡、蛋鸡或种鸡,引起关节渗出性的滑液囊膜炎及腱鞘滑膜炎,是除鸡毒支原体之外另一种引起家禽疾病的重要支原体病原,给国内外养禽业带来了很大的危害。鸡滑液囊支原体病主要通过疫苗免疫和抗菌药物进行控制,目前我国主要依靠抗菌药物控制该病。
本实验旨在筛选敏感的抗菌药物,为该发病蛋鸡场合理用药提供依据,对分离株的生物学特性进行研究,为开发鸡滑液囊支原体疫苗提供材料。
1 材料
1.1 抗菌药物抗菌药物原粉均由瑞普(天津)生物药业有限公司提供。
1.2 标准品标准阳性血清,标准阴性血清,MS 检验用菌株均购自中国兽医药品监察所。
2 方法
2.1 诊断2018 年,保定某中小型蛋鸡养殖场,30%鸡只发生跛行、瘫痪,采食量、产蛋量明显下降,经了解未免疫鸡滑液囊支原体疫苗,疑似发生鸡滑液囊支原体疫情。用IDEXX 鸡滑液囊支原体抗体检测试剂盒对鸡群ELISA 抗体水平进行检测。
2.2 病料采集及分离培养无菌采集附关节内容物和爪垫内容物,置于改良Frey 氏液体培养基内,37℃培养,待培养基颜色变黄后,接种到新的液体培养基中,稳定传代3 次。
将培养液接种到改良Frey 氏固体培养基,37℃培养7d,每天观察。待低倍显微镜下发现典型支原体菌落,挑取单个菌落接种至改良Frey 氏液体培养基培养至颜色变黄。
2.3 分离鉴定
2.3.1 鸡红细胞吸附试验取鸡红细胞悬液加入已培养好的固体培养基表面,室温下作用20min 后弃去,生理盐水洗涤2 次,在低倍显微镜下观察菌落表面有无红细胞吸附。……
