柴雅静，余晓雪，杨 琨,2*，乔自林,2,3

（1.西北民族大学 生命科学与工程学院，甘肃 兰州 730030；2.西北民族大学 生物医学研究中心/甘肃省动物细胞技术创新中心，甘肃 兰州 730030；3.西北民族大学 生物医学研究中心/生物工程与技术国家民委重点实验室，甘肃 兰州 730030）

血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF）又称为促血管因子（vascul-otropin，VAS），它对血管内皮细胞的增殖分裂等起到促进作用，可以使血管对一些大分子物质的通透性增强，刺激新血管生成，在生殖过程中也具有独特作用[1-3]。形态学研究证明，卵泡的发育和血管的发生是密不可分的。卵泡周围的血管网越密集，卵泡可吸收的营养就越多，发育就越快。反之，发育受阻形成闭锁卵泡[4]。

该实验以绵羊卵巢为实验材料，通过HE染色和免疫组织化学染色的方法检测血管内皮生长因子（VEGF）在绵羊卵巢中的表达及定位的特异性，为绵羊卵巢的卵泡发育提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 样本采集

该实验所需材料为绵羊的卵巢，于甘肃省兰州市屠宰场采集健康绵羊卵巢组织样本，经宰割后立即采取组织样本并放入4%多聚甲醛中固定。

1.2 材料处理

按照石蜡包埋的常规方法先取绵羊卵巢组织中的卵泡，对其形状修整后进行石蜡包埋，切成厚度为4～5 μm的组织切片，最后对切片进行HE染色以及免疫组织化学染色。

1.3 主要试剂

兔SP试剂盒（SP-0023）、VEGF多克隆抗体（兔）（bs-1665R）以及DAB染色试剂盒（C02-04001），均购于北京博奥森生物技术有限公司。

1.4 HE染色

将已经固定好的卵巢组织用水冲洗、梯度脱水、透明后进行浸蜡包埋，制作组织切片，然后进行脱蜡水化、染色、分化、脱水透明、封片等HE常规染色步骤。……