大豆球蛋白鼠源多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定
2021-07-13刘德果王一超
河南工业大学学报(自然科学版) 2021年3期
刘德果,席 俊,王一超,付 扬
河南工业大学 粮油食品学院,河南 郑州 450001
大豆中蛋白质含量丰富,高达40%,其组成与牛奶蛋白质相似,含有人体所有必需氨基酸,具有很高的营养价值[1]。但是大豆是公认的八大过敏原之一,过敏症状一般为皮疹、荨麻疹、呕吐、腹泻等,严重时可能出现休克甚至死亡[2]。大豆不仅以食品加工原料或制品出现在人们的餐桌上,而且作为食品添加剂具有改变食品的风味质构或者延长鲜切水果的保质期等功效[3-5]。随着大豆在食品加工中的应用更加成熟和多样,大大增加了人们对大豆及其相关制品接触的机会,导致有大豆过敏症状的人数明显升高[6]。
食物过敏原在食品中通常含量极少,且食品的成分一般比较复杂,大大增加了其检测难度[7]。大豆过敏原的检测一般有电泳法、PCR法、质谱法、色谱法、色谱-质谱法和免疫学检测法[8]。免疫学检测法具有特异性高、敏感性强和准确性高等优点[9],且容易实现过敏原的现场快速检测。大豆蛋白根据沉降系数被分为2S、7S、11S、15S[10],其中7S和11S含量最高[11],且是致敏性最强的2个组分[12],11S即是大豆球蛋白的主要组分。作者将提纯的天然大豆球蛋白免疫小鼠,制备得到鼠源多克隆抗体血清,为建立其免疫学检测技术做了铺垫。
1 材料与方法
1.1 材料
脱脂豆粉:鲲华生物技术有限公司;SDS-PAGE制备凝胶试剂盒:Biosharp公司;弗氏(不)完全佐剂:Sigma公司;羊抗鼠酶标二抗、琼脂糖凝胶CL-6B、TMB单组分显色液:北京索莱宝科技有限公司;Balb/c 雌性小鼠(6~8周龄):河南省动物实验中心。……
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