余冰洁, 程 钧, 宋 珊, 杨玲玲

0引言

眼部碱烧伤是一种常见又非常难治的眼外伤，可严重影响患者的视力。对于碱烧伤急性期的治疗，应主要关注于促进角膜和结膜上皮修复、减轻眼表炎症反应、抑制新生血管生成等方面。但是碱烧伤后眼表环境复杂，涉及多种反应，多种炎症因子的参与，角膜上皮往往难以修复。有研究发现NLRP3炎性小体介导的NLRP3-ASC-Caspase-1-IL-1β焦亡通路参与无菌性角膜损伤，抑制该通路可以减轻炎症反应，降低角膜的混浊程度，可作为提高眼部碱烧伤预后的一种新治疗方法[1]。左旋肉碱(L-carnitine，LC)又名左卡尼汀，是一种氨基酸衍生物，具有抗氧化，抗凋亡，抑制炎症反应[2]及渗透保护等作用，目前LC已广泛应用于干眼、青光眼、白内障等眼部疾病的治疗。LC可通过抑制信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路减少活性氧(reactive oxygen species，ROS)的产生，从而抑制炎症反应[3]，改善氧化应激所破坏的微环境[4]。我们猜想LC在碱烧伤中可能起到一定的作用。我们通过观察眼部碱烧伤后应用LC角膜上皮修复的情况，焦亡相关蛋白表达的变化，以确定LC在角膜上皮细胞修复及调节细胞焦亡的作用，寻找治疗眼部碱烧伤的新方法。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1主要实验试剂L-carnitine试剂(美国Selleck公司)；RIPA裂解液(北京索莱宝公司)；磷酸酶抑制剂(上海碧云天公司)；NLRP3抗体(MAB7578，美国R&D公司)；Caspase-1抗体(sc-56036，美国Santa Cruz公司)；Ki-67(ab16667)、p-STAT3抗体(ab2105，美国Abcam公司)；IL-1β(A1192)、STAT3抗体(A1192，武汉爱博泰克公司)；P63抗体(618901，美国BioLegend公司)；GAPDH抗体(T0004-HRP，美国Affinity公司)；HRP偶连山羊抗大鼠(S0009)、山羊抗兔(S0001)二抗(美国Affinity公司)；HRP偶连山羊抗小鼠二抗(AB0102，上海泊湾公司)；……