许 皓，刘建荣，倪 佳，任 飞，王力欣，王 峥，刘 莹

吉林特研生物技术有限责任公司,吉林长春 130122

绿脓杆菌是能够引起急性、高度传染性疾病的、可以导致水貂出血性肺炎的一种细菌。本菌革兰氏染色呈阴性，单个、成双或短链状存在，能单向运动，无芽孢，能形成荚膜，能分泌绿脓菌素和荧光素。采用日本血清分型系统将绿脓杆菌分为A～N 14种血清型。近年来，我国山东省、河北省、黑龙江省、吉林省等地主要的水貂养殖地区持续暴发流行水貂出血性肺炎，对水貂的致病力往往是致死性的，造成水貂严重的出血性肺炎，给养殖户带来了巨大的经济损失。本研究对2013～2016年不同省份病料的采集，进行了细菌分离鉴定和相关实验，结果表明绿脓杆菌G、B、I是最流行的血清型，是导致养殖场水貂大规模死亡的原因。

1 材料

1.1 菌株

绿脓杆菌标准菌株ATCC27853为杭州天和微生物试剂有限责任公司的产品。

1.2 试验动物

18～20日龄SPF级ICR小鼠，购自长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。

1.3 主要试剂

绿脓杆菌分型血清为日本生研株式会社的产品；琼脂（Agar）均为Sigma-Aldrich公司的产品；蛋白胨、酵母粉均为英国OXOID公司的产品；NaCl为广东光华科技股份有限公司的产品；PCR反应预混液Ex Taq™ 为生工生物工程（上海）股份有限公司的产品；生化鉴定管、药敏片为杭州滨河微生物试剂有限公司的产品。

1.4 主要仪器

超净工作台（SW.CJ.2FD）购自上海博迅实业有限公司医疗设备公司；空气恒温摇床（KYC111）购自上海福玛实验设备有限公司；PCR仪（T100TM Thermal Cycler）购自伯乐生命医学产品有限公司；……