王泽田， 吴春荣， 齐 越， 徐 丹， 孙科远， 唐建国

（复旦大学附属上海市第五人民医院创伤急救危重症医学中心，上海 200240）

白念珠菌是人类肠道的常见条件致病菌，正常情况下与宿主之间维持平衡状态。然而，当肠道屏障受损，如休克肠道缺血、消化道穿孔、肠梗阻、肠道手术等情况下，白念珠菌可入侵肠上皮屏障，进入无菌体腔，如胸腹腔等，甚至进入血流，导致侵袭性白念珠菌感染[1-2]。临床诊断白念珠菌感染主要依靠微生物涂片和培养，但周期较长，阳性率不高。因此，寻找白念珠菌感染的生物标志物是急需解决的难题。

外泌体包含许多信号分子、脂类、蛋白质、DNA、mRNA、miRNA和siRNA等，能在细胞间传递重要的介质，并顺利通过体液循环而不受体内各种酶的降解[3-5]。因外泌体具有特异性生物标志物，能为白念珠菌感染提供有价值的诊断，所以笔者尝试分析血清外泌体蛋白质组学，寻找侵袭性白念珠菌感染的特异性标志物。

材料和方法

一、菌株和实验动物

白念珠菌标准菌株ATCC10231、金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC29213和大肠埃希菌标准菌株ATCC25922购于上海鲁微科技有限公司；SPF级别雄性Wistar小鼠60只，购于上海斯莱克实验动物有限公司。上海交通大学生命科学院动物房饲养，实验前适应喂养2周，其中8只用于白念珠菌感染的外泌体蛋白组学实验，其余用于差异蛋白鉴定实验。

二、菌液配置和模型构造

国内、外研究显示，尾静脉注射LD50菌液浓度2.5×108CFU(colony forming units)1mL建立小鼠白念珠菌侵袭感染模型。本课题组前期研究证明该浓度的有效性[6]。……