杨保晴,张子恺,吴 昊,陈毓华,梁爱斌,傅建非

(同济大学附属同济医院血液科，上海 200065)

骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndro-mes,MDS)是一组起源于骨髓造血干/祖细胞的恶性克隆性疾病，其特征是骨髓的一系或多系病态造血，外周血细胞减少及急性髓系白血病(acute mye-loid leukemia,AML)转化等[1]。随着二代测序(next generation sequencing,NGS)技术的发展，越来越多在MDS中具有病理意义的基因突变被确定[2]。这些分子指标对患者的疾病诊断、危险分层、预后评估和指导个体化治疗等具有重要的临床意义。然而，不同中心关于MDS基因的突变特征及其与临床特征关系的报道不尽相同。本研究分析了同济大学附属同济医院血液科62例MDS患者的基因突变谱及染色体核型、临床特征、实验室检查结果、MDS亚型、IPSS-R积分等指标，并探讨了基因突变对上述指标的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

依据《骨髓增生异常综合征中国诊断与治疗指南》(2019年版)标准，经骨髓形态学、免疫分型、细胞遗传学、分子生物学和骨髓活检等检查明确诊断的62例初发MDS患者纳入本研究。其中MDS伴单系病态造血(MDS with single lineage dysplasia,MDS-SLD)3例，MDS伴多系病态造血(MDS with multilineage dysplasia,MDS-MLD)32例，MDS伴环形铁粒幼细胞(MDS with ring sideroblasts,MDS-RS)7例，MDS伴单纯5q-1例，MDS伴原始细胞增多 Ⅰ 型(MDS with excess blasts subtype 1,MDS-EB-1)10例，MDS伴原始细胞增多 Ⅱ 型(MDS with excess blasts subtype 2,MDS-EB-2)9例，无MDS不能分类型(unclassifiable MDS,MDS-U)。

1.2 方法

1.2.1 标本收集 抽取初诊MDS患者的骨髓血5 mL，EDTA抗凝，采用Ficoll密度梯度离心法获得单个核细胞，应用Qiagen公司DNA提取试剂盒提取基因组DNA，置-70 ℃冰箱备用。

1.2.2 NGS测序 所测基因均为与MDS相关、突变率高、较为热门的34种基因。构建34个MDS相关的基因文库。通过Ion Ampliseq多重PCR扩展技术，一次性抓取待检测的所有基因，并将构建好的文库用Life Technologies平台Ion Proton半导体测序仪进行检测。……