刘雯 侯晨辉 李江

1 郑州铁路职业技术学院护理学院，河南 郑州 451460

2 河南省天然药物提取和医疗技术应用工程研究中心，河南 郑州 451460

据统计，我国骨质疏松症患者已超9 000万，其中约60 %～70 %为绝经后妇女[1]。目前治疗绝经后骨质疏松症的药物有生长激素类药物、氟化物等，此类药物虽然可调节骨代谢，但副作用明显[2]。有文献[3]报道益肾补骨汤对骨质疏松症有效且安全。BMP/Smads通路在骨形成过程中发挥重要的调控作用，BMP-2可通过Smads调控下游靶基因Runx 2，Runx 2是成骨细胞特异性转录因子，促进骨形成[4]；OPG/RANKL/RANK则是骨吸收的经典调控通路，可抑制破骨细胞的活性，减少骨吸收[5]。本研究将基于上述通路，研究益肾补骨汤对去卵巢大鼠骨代谢的影响及其可能的机制。

1 材料与方法

1.1 材料

61只8～10周龄SPF级SD雌鼠，体重180～200 g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司[SCXK(京)2019-0001]；尼尔雌醇购自廊坊高博京邦制药有限公司(20160428)；中药材均购自同仁堂大药房；大鼠血清BALP(20180805)、BGP(20180121)、PINP(20161114)、TPACP5b(20180215)、NTX-Ⅰ(20180314)试剂盒购自武汉云克隆科技股份有限公司；HE染色试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司(20180624)；RNA提取试剂盒及反转录试剂盒均购自美国Promega公司(20 160 620 A、20170518B)；实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)预混液购自美国RBGPhe公司(Y161121)；NMP-2(180528)、Smad-1/5/8(170630)、磷酸化Smad-1/5/8(p-Smad1/5/8，181205)、Runx 2(170712)、OPG(190415)、RANKL(181113)、RANK(181012)一抗及二抗均购自美国Cell Signaling公司；引物合成委托苏州金唯智生物科技有限公司进行。

Mk3酶标仪购自美国Thermo Fisher公司；MM-7金相光学显微镜购自上海光学仪器一厂；RZ-Digumus小动物双能X线骨密度仪购自美国Kubtec公司(精确度误差为 1.5%)；HHQ-3558石蜡切片机购自杭州艾普仪器设备有限公司；165-8001小型垂直电泳仪购自美国伯乐公司；……