谷开保 宋小桂 张小军

扬子江药业集团江苏海慈生物药业有限公司 江苏 泰州 225300

引言

莫西沙星为药物盐酸莫西沙星注射液的重要成分。其属于一种新式8-甲氧基喹诺酮类制剂。其有着相当强的抗菌活性，有着良好的抗菌谱。莫西沙星具有相当好的药动力特点以及安全度，吸收满意。生物利用度为90.00%[1]，血浆蛋白结合率达到了50.00%[2]，有着比较好的组织穿透性。为了全面分析HPLC法测定盐酸莫西沙星氯化钠注射液中N-甲基莫西沙星含量，本文对上述命题进行全面分析，现汇报如下。

1 基线资料

实验使用日本岛津公司生产的LC-20A型高效液相色谱设备；电子天平；pH计；莫西沙星对照品（纯度水平96.1%，欧洲药典委员会）；杂质1（纯度99.9%）、杂质2（96.4%）、杂质3（99.6%）、杂质4（95.6%）、杂质5（99.9%），上述物质提供厂家为苏州朗科生物技术有限公司。盐酸莫西沙星氯化钠注射液生产厂家为扬子江药业江苏海慈生物药业有限公司，国药准字H20193112。

甲醇色谱纯，实验用水为纯化水，其他试剂则为分析纯。

2 方法

2.1 色谱条件

实验选择G e m i n i—N X C 1 8为色谱柱，条件为(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为浓度1.0%三乙胺溶液（磷酸调节为PH2.5）:甲醇（7:3）。柱温为40℃；波长为293nm；进样量设定为10μL，流量设定为1.0ml/min。

2.2 溶液制备方法

2.2.1 空白辅料溶液。依照既定处方，配置好内部不存在盐酸莫西沙星溶液，灭菌处理获得。

2.2.2 专属性试验溶液。择取对照品药物、杂质1-5、N-甲基莫西沙星适量。加入溶剂（水500ml、磷酸1ml、0.05g无水亚硫酸钠，加水稀释到1000ml）。制作为莫西沙星1.0mg/ml的溶液。杂质1-5、N-甲基莫西沙星分别为1.0μg混合性溶液。

2.2.3 适用性试验溶液。择取适当N-甲基莫西沙星以及对照品药物适当，依照专属性试验溶液制备方法制作溶剂，将其溶解成1ml内含有0.8mg莫西沙星、0.8μgN-甲基莫西沙星混合溶液。

2.2.4 对照品溶液。取用适当N-甲基莫西沙星，加入项目（2）内的溶剂，制作0.8μg/ml的N-甲基莫西沙星混合溶液。

2.2.5 供试品。取用适当供试品，依照既定方式流动相制作为0.8mg/ml莫西沙星的溶液。

2.3 适用性试验

取用适当适用性溶液，进样共计6次，全面记录色谱图。所取得的N-甲基莫西沙星和莫西沙星的分离度在2.0以上；而拖尾因子在2.0以下；关于理论板的莫西沙星峰计均情况完全符合规定。N-甲基莫西沙星峰面积RSD值0.63%，其保留时间RSD0.17%。

2.4 专属实验

取用空白的辅料溶液、专属溶液，进样处理，全面记录色谱图。保证空白的辅料溶液不存在干扰。N-甲基莫西沙星和相关成分的色谱峰分离度符合要求。

2.5 定量限以及检测限

选择浓度既定的N-甲基莫西沙星溶液稀释处理。测定空白位置信号，加以对比。如果信噪比的S／N在10以上，并且进样6次之后密度RSD在5.0%以上后，将其视为定量限，把其稀释处理3倍之后确定好检测限。详细结果为：N-甲基莫西沙星的具体检测限为0.0510μg/ml，定量限为0.1527μg/ml。

2.6 线性范围

选择适当N-甲基莫西沙星。加入项目2.1中的（2）项溶剂制作方案，溶解制作浓度为0.103～1.527μg/ml的N-甲基莫西沙星，进样后记录好色谱图。本实验中，纵坐标为峰面积、横坐标为浓度水平，绘制曲线。取得N-甲基莫西沙星回归方程为A=53074C+464.92（r=0.9989）。

详细实验结果为：当N-甲基莫西沙星于0.103～1.527μg/ml范围中，浓度水平和峰面积线性关系良好。

2.7 加样回收实验详细结果

取用适当供试品，一共9份。依照限度水平的120.0%、100.0%以及80.0%几个浓度水平加入N-甲基莫西沙星溶液内，完成测定工作。计算出N-甲基莫西沙星详细回收率情况，具体结果参照表1。

续表

在表内我们能够看出，N-甲基莫西沙星回收率均值为94.24%。RSD水平2.51%。这种方式精准度满意。

2.8 重复性实验

选择6份相同的供试品。精密性称量，加入到N-甲基莫西沙星溶液之内。依照项目2.1条件中的（2）项目制作成溶剂，0.8mg/ml西莫沙星以及0.8μg/ml的N-甲基莫西沙星混合液。混合均匀。将其视为供试品溶液。分别选择供试品溶液按照上述方式进样处理，记录好色谱图资料，分析并计算出溶液内杂质水平。具体检测结果为：溶液中的N-甲基莫西沙星含量水平为0.13%，而RSD则为1.59%。代表该方法有着满意的重复性。

2.9 耐用性实验

2.9.1 依照2.1中项目（3）的方法，制作出药物供试品。于避光以及室温环境下放置处理，时间为12h。

于0.0h、2.0h、4.0h、6.0h、8.0h、12.0h取样，开展检验工作。相关实验结果证实：在既定时间中，N-甲基莫西沙星均值达到了9509，RSD则为1.61%。代表溶液有着良好的稳定性。

2.9.2 色谱条件参数改变情况。变更柱温，范围为±5℃、流动相pH值±0.2、流动相为±0.1ml/min、各类品牌的色谱柱等等参数。全面评价N-甲基莫西沙星含量水平影像情况，证实当以上参数发生轻微变化后，对于N-甲基莫西沙星水平测定影响不显著，代表该法的耐用性满意。

2.1 0 关于样品测定

针对于共计3批次盐酸莫西沙星氯化钠注射液实施测定，结果证实：样本内的N-甲基莫西沙星含量水平为0.03%。

3 讨论

高效液相色谱法（HPLC）也被称之为“高分离度液相色谱”、“高压液相色谱”之称。该法属于总色谱法重要分支[3]。流动项为液体，经高压力输液体系，把各类极性单一溶剂/各个比例混合溶剂、缓冲液体等泵入到带有固定相色谱柱之内。当内部的相关成分被全面分离之后，完成检测工作，利用这种方式分析试样情况。现如今，高效液相色谱法已经在诸多领域内得以应用。

结合盐酸莫西沙星药物的杂质谱解析情况，不难发现，在其内部存在很多杂质以及N-甲基莫西沙星。但值得说明的是，扬子江药业江苏海慈生物药业有限公司产品内仅仅包含N-甲基莫西沙星物质。基于这种情况，为了在根本上确保药物的质量水平，相关工作人员有必要对于注射液内的N-甲基莫西沙物质水平加以控制。