嵌合犬瘟热病毒rHBF-vacH株的构建及鉴定
2021-06-25卜研冯楚楚闫喜军薛向红
卜研,冯楚楚,闫喜军,薛向红
(中国农业科学院特产研究所,吉林 长春 130112)
犬瘟热(Canine Distemper,CD)是由犬瘟热病毒(Canine Distemper Virus,CDV)感染多种肉食动物而引起的一种急性热性、高度接触性传染病[1]。犬瘟热病毒对不同宿主的易感性和致病性不同,死亡率为50%~100%。半个多世纪以来,犬瘟热防控主要依赖于疫苗免疫,犬瘟热弱毒活疫苗已经在世界范围内被广泛应用,且防控效果不错。然而,近年来,世界各地出现了多起野生动物和家养动物感染犬瘟热发生死亡的报道[2-5],其发生机制尚不清楚。犬瘟热病毒弱毒疫苗株是通过连续鸡胚和细胞系传代致弱获得的,其基因型属于美洲I型[3]。我国犬瘟热病毒流行毒株主要是亚洲I型,并呈现多基因型流行的特征[6]。
犬瘟热病毒属于副黏病毒科麻疹病毒属成员,其基因组是单股负链非分节段的RNA,从3'到5'端依次编码核蛋白(N)、磷蛋白(P)、基质蛋白(M)、融合蛋白(F)、血凝素蛋白(H)和大聚合酶蛋白(L)6个结构蛋白,以及V和C两个非结构蛋白[7]。其中,F和H蛋白暴露于病毒囊膜表面,决定着犬瘟热病毒的细胞嗜性和致病性,同时也是关键的保护性抗原[8,9]。反向遗传技术的发展和成熟,为我们系统性地研究病毒结构与功能、感染与免疫机制提供了强有力的支撑。Veronika von Messling等[10]将犬瘟热病毒疫苗株Onderstepoort的H基因替换为强毒CDV5804株的H基因,比较了其与亲本毒株形成的合胞体大小、F和H蛋白表达量以及病毒生长动力。结果显示,H蛋白决定了病毒感染细胞的趋向性和致病性。2010年Bevan Sawatsky和Veronika von Messling[10]构建了将强毒株CDV5804的H基因替换为onderstepoort H基因的重组病毒5804P-HOL,发现此重组病毒虽然与亲本强毒CDV5804保持了基本一致的生长特性,但却对雪貂完全减毒或无毒。……
