孙志伟, 张文君

(哈尔滨商业大学 药学院，哈尔滨 150076)

蓬子菜(GaliumverunL.)为茜草科(Rubiaceae)拉拉藤属(Galium)药用植物，入药部位为其干燥全草，蓬子菜具有行血祛瘀、消肿通经、清热抗炎以及利湿止痒之功效[1-3].本课题组前期药效学实验表明体积分数60%乙醇(EtOH)洗脱部位为治疗周围血管病的有效部位[4-5]，经紫外分光光度法测定，含总黄酮量可达58%.为进一步展开蓬子菜总黄酮活性的物质基础研究，本实验采用硅胶柱色谱、HPLC等现代分离技术与方法对该部位进行分离，并通过理化分析、1H-NMR、13C-NMR数据解析，鉴定了该10个化合物的化学结构，见图1.

图1 蓬子菜的化合物结构

1 仪器与材料

超导核磁共振光谱用INOVA-500、INOVA-400和Bruker-400型超导核磁共振光谱仪(TMS为内标)；制备HPLC采用Waters公司的Delta-600-2487型；分析型色谱柱，大连依利特公司Hypersil ODSⅡ(5μm 4.6×200 mm)；制备型色谱柱，制备色谱柱为Zorbax-SB-C18(9.4 mm×250 mm)；柱色谱硅胶，青岛海洋化工厂(140～200目，200～300目)；薄层色谱硅胶板，德国Merck公司(Silica gel60F254)；硅胶(青岛海洋化工厂，140～200，200～300目)；柱色谱用反相ODS(ODS-AM)为YMC公司产品；色谱层析用化学试剂为分析纯(天津试剂一厂).

本实验所用蓬子菜采自安达市，由哈尔滨商业大学张德连副教授鉴定为茜草科拉拉藤属植物蓬子菜(GaliumverunL.).

2 提取分离

蓬子菜干燥全草10 kg粉碎后用体积分数70%EtOH回流提取2次，每次2 h，合并提取液，减压回收EtOH后，将其浓缩物以体积分数20%EtOH稀释，通过AB-8大孔树脂柱，依次用体积分数20%EtOH、60%EtOH、95%EtOH洗脱，洗脱液减压浓缩得到各有效部位.

体积分数60%EtOH有效部位干法上样，以二氯甲烷-甲醇为洗脱溶剂，二者比例依次为100∶1、100∶2、100∶5、100∶10、100∶20、100∶40、100∶100.每个梯度的洗脱液用薄层板检测，合……