辛佳凌 刘丝荪

1.新余市人民医院,江西 新余 338025；2.南昌大学第一附属医院,江西 南昌 336000

卵巢癌的死亡率在妇科恶性肿瘤中居于首位，严重威胁着女性的生命健康[1]。顺铂DDP在卵巢癌的治疗中具有重要作用，但长期使用会产生耐药性，是肿瘤复发的原因之一[2]。有研究发现稀土氯化镧对肿瘤具有较高的亲和性，与顺铂共同作用，逆转顺铂的耐药性以增强顺铂对肿瘤细胞的杀伤作用[3]。本文对氯化镧增强卵巢癌顺铂耐药细胞敏感性的相关分子机制进行探讨，报道如下。

1 资料与方法

1.1方法

1.1.1细胞培养 将COC1、COC1/DDP(均购自上海奥陆生物科技有限公司)细胞复苏后悬浮于含10%胎牛血清培养基中，37℃、90%湿度、5%CO2培养箱培养，取对数生长期细胞，重悬并调整为1×104/mL，培养24h。

1.1.2MTT法检测增殖抑制率 上述细胞，加入0、2、3、4μmol/L氯化镧(购自美国sigma公司)培养48h，同时用IC50浓度的DDP联合上述浓度氯化镧培养COC1与COC1/DDP细胞48h。每个浓度设置3个复孔，48h后采用MTT(购自上海碧云天生物工程有限公司)试剂盒测定吸光度值，计算细胞增殖抑制率，细胞增殖抑制率=(1-实验组OD/对照组OD值)×100%。

1.1.3蛋白凝胶电泳检测蛋白表达情况 取对数期COC1/DDP细胞，制备成浓度为1×106/mL的单细胞悬液，将其分为空白对照组(正常培养)、氯化镧组(添加4μmol/L氯化镧)、顺铂组(添加23.08μg/ml顺铂)与氯化镧+顺铂组(添加4μmol/L氯化镧+23.08μg/ml顺铂)，每个浓度设置3个复孔，培养48h，离心取沉淀，PBS洗涤，裂解30min，收集细胞于1.5mLEP管，离心取上清液，采用BCA蛋白定量法测定蛋白浓度进行蛋白凝胶电泳，采用凝胶成像系统分析蛋白表达量。

2 结……

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