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GW9662对内脏脂肪素诱导的THP-1源性泡沫细胞的作用

2021-06-22庄世虹成蓓

中国老年学杂志 2021年12期

庄世虹 成蓓

(1南京医科大学附属南京医院 南京市第一医院老年医学科,江苏 南京 210006;2华中科技大学同济医学院附属协和医院老年医学科)

在动脉粥样硬化(AS)形成的过程中,过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)γ在糖脂代谢平衡中的作用越来越受到重视,它与代谢综合征的胰岛素抵抗、高血压、肥胖的发生密切相关。PPARγ作为一种重要的核受体,其被证实能在巨噬细胞核内表达,并能通过调控胆固醇代谢的关键酶来保持脂质稳态〔1〕。Dahl等〔2〕发现内脂素(visfatin)在AS斑块巨噬细胞中表达明显增加,冠心病患者中其表达水平明显升高。visfatin有促进巨噬细胞源性泡沫细胞形成的作用,本研究运用PPARγ拮抗剂GW9662进一步确证PPARγ信号通路对visfatin调控的巨噬细胞泡沫化的影响。

1 材料与方法

1.1主要试剂 人单核细胞(THP-1)购自武汉大学生物研究所,RPMI1640干粉培养基和胎牛血清购自美国Gibco公司,GW9662购自瑞士Alexis公司,佛波酯、TritonX-100购自美国Sigma公司,人重组visfatin购自美国Peprotech公司,蛋白提取试剂盒购自上海Beyotime公司,总胆固醇(TC)测定试剂盒购自北京五洲元业生物公司,游离胆固醇(FC)测定试剂盒购自美国Cayman公司,丽春红染液、异硫氰酸罗丹明(TRITC)标记的荧光试剂盒和异硫氰酸荧光素(FITC)标记的荧光试剂盒购自武汉博士德公司,鼠抗人腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)结合盒转运蛋白(ABC)A1和兔抗人ABCG1一抗购自英国Abcam公司,硝酸纤维素膜购自英国Whatman公司,增强型化学发光(ECL)液发光试剂盒购自美国Pierce公司,辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠和羊抗兔二抗购自北京中杉金桥公司,兔抗人β-actin一抗购自美国Cell signal公司,其他试剂均为国产分析纯。……

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