孙吉凤 何海涛

(1长春医学高等专科学校，吉林 长春 130031;2吉林大学基础医学院)

喉癌是头颈部常见恶性肿瘤，统计数据表明全世界每10万人中有5.1～10.0 例喉癌患者〔1〕，约60%的喉癌患者确诊时已处于Ⅲ期或Ⅳ期〔2〕,手术仍是喉癌治疗的主要手段，手术切除辅助放疗、化疗、新型靶向治疗等综合手段治疗也越来越多被采用〔3,4〕，我国目前90.34%的喉癌患者生存率不超过5年，且复发、浸润和转移是影响预后的主要因素〔5〕。

Ezrin与肿瘤转移存在密切关系，相关研究越来越受到学者重视〔6〕。有研究表明〔7,8〕，Ezrin在喉癌转移灶中的表达高于原发灶，在促进喉癌侵袭和转移的过程中表达量持续增高，但深入的相关分子机制研究目前尚未见报道。中药黄芩在治疗喉癌方面的作用早在《黄帝内经》中即有介绍〔9〕。黄芩素(BAI) 作为黄芩的主要有效成分，在抗肿瘤方面的研究近年也有报道〔10〕，本科研团队孙吉凤等〔11〕研究表明BAI可以影响喉癌Hep-2细胞周期分布，诱导细胞凋亡。有研究表明，Ezrin在喉鳞状细胞癌组织中的高表达与肿瘤侵袭相关〔12〕。本研究拟分析BAI通过调节Ezrin相关信号转导通路对喉癌细胞侵袭、转移的影响。

1 材料及方法

1.1细胞与试剂 人喉癌Hep-2 细胞株购于上海细胞生物研究所。BAI购于美国SIGMA公司，用二甲基亚砜(DMSO)溶解。RPMI1640培养基、胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶等细胞培养用试剂购于美国Gibco/BRL公司。四甲基偶氮唑盐(MTT)购于北京鼎国生物技术公司，Transwell小室购于美国Corning-Costar公司，Trizol 试剂购于美国Invitrogen 公司，Prime Scri PtRT Master Mix 购于Takara公司，Ezrin、RhoA基因引物由Takara公司合成，p-Ezrin、Ezrin、RhoA抗体购于美国Santa Cruz公司，GAPDH抗体、二抗购于博士德公司，二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量试剂盒、化学发光(ECL)检测试剂盒购于凯基生物技术公司。……