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苦楝提取物对奶畜乳房炎致病菌的抗菌活性研究

2021-06-18李占臻安加俊贾红勋尚红梅

河南畜牧兽医 2021年9期

买 光,李占臻,安加俊,贾红勋,白 波,尚红梅

(1.长治市潞州区堠北庄畜牧兽医中心站,山西 长治046000;2.咸阳市动物疫病预防控制中心)

苦楝属楝科楝属的落叶乔木,性寒、味苦、有毒,具有 清热燥湿、杀虫止痒、行气止痛、疗癣的功效[1]。现代药理作用表明苦楝皮具有驱虫,抗溃疡、抗腹泻和利胆作用,其提取物具有镇痛消炎、抗血栓、抑菌、抗病毒、抗肿瘤等多种活性。该试验以苦楝皮为研究对象,采用超声波提取和纸片扩散药敏试验,得到苦楝提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果,为兽医临床用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

1.1.1 仪器:紫外可见光分光光度计、烘箱、无菌操作台、小型粉碎机、生化培养箱、灭菌锅、培养皿、索氏抽提器。

1.1.2 样品:试验所用苦楝皮为苦楝全皮,样品经烘箱55℃烘干、粉碎,过20目筛备用。

1.1.3 供试菌种:2019年7月,山西省长治市潞州区堠北庄一奶牛散养户奶牛急性乳房炎,将乳样送至乡镇兽医站,经兽医镜检与分离培养,初步判断为大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合感染引起的急性乳房炎。分离得到的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌一直保存在堠北庄畜牧兽医站,该试验以这两种菌为供试菌种。

1.2 苦楝皮提取物的制备

称取苦楝皮粉10g,用60%的无水乙醇为溶剂,采用姜萍等[2]优化的提取工艺,即:提取温度60℃,料液比(质量∶体积)1∶9,提取时间80min,提取4次。合并提取物,过滤,将滤液在40℃下减压蒸干,得到苦楝皮的粗提取物粉末。

1.3 菌悬液制备

取冻干菌种,加入0.5mlBHI培养基,震荡,吸取上层悬浮液,移植于斜面培养基,37℃培养箱培养24h后,用无菌生理盐水冲洗斜面,得到菌悬原液,在显微镜下通过血细胞计数板,稀释调节菌体浓度为106~108个/ml,冷藏备用[3]。……

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