常 裕，何亚蓉，王凯琪，齐向英

(延安大学 生命科学学院，陕西 延安 716000)

山丹丹学名山丹(Liliumpumilum.DC)为百合科百合属多年生草本植物[1]。山丹丹是延安市市花，不仅可以作观景花卉，还有许多药用价值。关于山丹丹的组织培养，国内有不少的研究者开展了大量的工作。以山丹丹的鳞片为材料的研究结果表明，山丹丹鳞片在不同浓度的IBA和NAA浓度组合中明显表示出不同的适应性[2]。王凯[3]等以南泥湾野生山丹丹鳞茎为材料建立野生山丹丹快繁和植株再生系统。但目前国内对山丹丹外植体诱导出的愈伤组织分化研究尚未见报道。本研究通过对山丹丹愈伤组织经过继代培养后，再进行分化培养，研究山丹丹愈伤组织分化成植株的可能性。

1 实验部分

1.1 材料

实验用材料为延安地区野生山丹丹鳞片诱导形成的愈伤组织，由延安市宝塔区山丹生物科技有限公司提供，保存于陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心。

1.2 实验方法

1.2.1 继代培养

将山丹丹愈伤组织在无菌条件下用镊子夹碎成0.5 cm×0.5 cm的小方块，接入到继代培养基MS+6-BA 0.8 mg/L+IBA 0.2 mg/L+TDZ 0.01 mg/L+蔗糖25 g/L，pH=6.8。每瓶5小块愈伤组织，于25℃光照条件下培养20 d。

1.2.2 分化培养

分化培养基设计采用3因素3水平正交实验进行(表1)，所有培养基添加蔗糖25 g/L，pH=6.8。在无菌条件下将继代培养20 d的愈伤组织再次用镊子夹碎成0.5 cm×0.5 cm的小方块转接在分化培养基中。每个处理组合接种20瓶，每瓶接种5块，每个处理共计100块。接种后在散光条件下培养7 d然后转入光培养。以继代培养为对照组。……