周惠惠 胡立学 刘佳佳 梅兴国，3*

1.湖北科技学院药学院，湖北 咸宁 437100；2.湖北真奥医药研究院有限公司，湖北 咸宁 437000；3.军事医学科学院毒物药物研究所，北京 100850

二丁基羟基甲苯(Butylated hydroxytoluene,BHT)作为一种脂溶性抗氧剂，稳定性高，抗氧化能力强，是我国生产量最大的抗氧化剂之一，常用于食品、保健品、药品中[1]。2020版中国药典[2]中收录该品种的含量测定采用高效液相色谱法，也有文献[3-4]采用气相色谱法。本文参照2020版中国药典及相关文献[5-7]并在此基础上进行优化，建立了高效液相色谱法测定维生素D3软胶囊中抗氧剂BHT的含量，现报导如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器 40D高效液相色谱仪(岛津公司)；XSE105电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多)；XW-80A涡旋混合仪(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)。

1.2 试药 甲醇为色谱纯(天津赛孚瑞科技有限公司)；乙醇为色谱纯(天津赛孚瑞科技有限公司)；纯化水(杭州娃哈哈集团有限公司)；二丁基羟基甲苯对照品(中国食品药品检定研究院，批号190065-201602)；维生素D3软胶囊(批号200617、200712、200723，自制)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：DiamonsilC18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：A相为甲醇-水(9∶1)、B相为甲醇-乙醇(8∶2)，梯度洗脱(0～10 min时为A；10～30 min时为B；30～40 min时为A)；检测波长：278 nm；柱温：35 ℃；流速：1.0 mL/min；进样量：20 μL。

2.2 溶液配制

2.2.1 对照品溶液的配制 称取BHT对照品约10mg置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为BHT储备液。精密吸取1 mL置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。

2.2.2 供试品溶液的配制 称取维生素D3软胶囊内容物适量(相当于BHT 0.2 mg)置20 mL容量瓶中，加适量甲醇溶解涡旋5 min，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置分层，取上清液过滤进样。……