李伟，陶云珍，王运中，徐俊，魏佳，季健(通信作者)

苏州大学附属儿童医院 (江苏苏州 215025)

大肠埃希菌是儿童感染性疾病常见的病原菌，可定植在肠道，也可引起呼吸道感染、尿道感染、血流感染等肠外感染[1]。近年来，随着免疫抑制剂使用和侵入性治疗措施的开展，儿童大肠埃希菌血流感染所致的脓毒症发病率明显增高，同时其可侵入脑脊液，导致脑膜炎或脑膜脑炎[2]。大肠埃希菌毒力强，所致的脓毒症、脑膜炎或脑膜脑炎等侵袭性感染是儿童尤其是新生儿重要感染性疾病，可造成患儿各系统严重损害，甚至危及生命[3]。此外，随着抗菌药物的广泛使用，大肠埃希菌耐药现象日趋严重[4]。基于此，本研究探讨苏州地区儿童血液和脑脊液等侵袭性感染大肠埃希菌的分布与耐药情况，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 菌株

以苏州大学附属儿童医院2018年1月至2019年12月患儿血液、脑脊液等穿刺获得的体液标本中检出的大肠埃希菌作为研究对象(剔除同一患儿重复菌株)，所有菌株均采用全自动基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS，BRUKER)鉴定。

1.2 方法

1.2.1细菌基因组提取

采用煮沸-冷冻法快速提取大肠埃希菌基因组DNA[5]；采用接种环挑取一环大肠埃希菌菌落，将其置于含有1 ml无菌水的EP管中，振荡混匀，然后将EP管置于100 ℃金属浴中30 min，取出后放入-20 ℃冰箱冷冻30 min，之后室温完全解冻，然后以10 000 rpm离心2 min，取上清液加入新的EP试管中，采用紫外分光光度法测定其浓度和纯度后将其置于-20 ℃冰箱作为模板保存备用[6]。……