魏义杰毛晓健傅榕冰伍林泽胡旭红童晓云黄 丰*

（1.腾冲市中医医院，云南 腾冲679100； 2.云南中医药大学，云南 昆明650500； 3.云南中医药大学第一附属医院，云南 昆明650021）

支气管哮喘是以气道炎症为代表的多种病理因素参与的慢性呼吸道疾病，最新报道显示，我国患者已有4 750万［1］，因此，相关工作的推进日益紧迫。正常人体也会分泌黏液，黏液作为固有免疫系统的第一道屏障，具有保护和湿润气道的作用，然而在某些病理状态下，气道粘液分泌异常是哮喘病死率居高不下的重要原因［2⁃3］。因此，药物有效的干预其生成有积极地临床意义。

化痰活血方由三子养亲汤加桃红四物汤组成，本课题组前期研究显示，该方可抑制哮喘小鼠肺泡灌洗液中多种炎性因子的生成，并且能明显抑制与黏蛋白MUC5AC 生成密切相关的IL⁃13 的生成［4⁃6］。因此，本实验拟观察化痰活血方调节哮喘小鼠肺组织IL⁃13／MUC5AC 通路中各分子的变化，探讨其可能作用的分子机制。

1 材料

1.1 动物 Balb／c 雌性小鼠，6 周龄，购自长生生物技术股份有限公司，生产许可证号［SCXK（辽）2015⁃0001］。

1.2 仪器 超声雾化仪（德国百瑞有限公司）；酶标仪［美谷分子仪器（上海）有限公司］；RT⁃qPCR 仪（美国罗氏公司）；离心机（德国海蒂斯公司）。

1.3 试剂 OVA（美国Sigma 公司，批号A5253，Grade II）；Al（OH）3（上海阿拉丁生化科技有限公司，批号38701）；地塞米松（美国Sigma 公司，批号D1756）；抗MUC5AC 抗体（武汉伊莱瑞特生物科技有限公司，批号E⁃AB⁃40037）；抗IL⁃13 抗体（批号bs⁃0560R）、抗IL⁃4Rα 抗体（批号bs⁃23579R）、抗GAB2 抗体（批号bs⁃2885R）、抗Phospho⁃GAB2 抗体（批号bs⁃3177R）、抗FOXA2 抗体（批号bs⁃2358R）（北京博奥森生物技术有限公司）；抗Phospho⁃IL⁃4Rα 抗体（批号PA5⁃38614）、抗Phospho⁃IL⁃13Rα1 抗体（批号PA5⁃38607）（美国Thermo Fisher 公司）；……